[发明专利]一种铁皮石斛精制多糖及其制备方法

说明书

本发明涉及药物提取领域，特别是一种铁皮石斛精制多糖及其制备方法。本发明提供的铁皮石斛精制多糖具有良好的抗氧化活性，尤其清除羟自由基能力良好。

技术领域

本发明涉及药物提取领域，特别是一种铁皮石斛精制多糖及其制备方法。

背景技术

铁皮石斛(Dendrobium officinale)是一种兰科植物，又名黑节草，为多年生附生型草本植物，长于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上，在自然野生状态下萌发率低，且必需与真菌共生才能萌发，再加上其生长缓慢，野生石斛已经很少，已被列为我国重点保护的珍惜濒危药用植物。主要分布我国的广西、浙江、云南、安徽等地。《中华人民共和国药典》中记载铁皮石斛具有益胃生津，滋阴清热的功能。多糖、氨基酸、石斛碱是铁皮石斛的主要有效成分，现代研究表明铁皮石斛有增强免疫、抗疲劳、抗氧化、促消化、降血糖、降血压、抗肝损伤、抗肿瘤等方面药理作用。因而具有“药中黄金”、“救命仙草”的美誉。

铁皮石斛与其他石斛相比，多糖含量较高，药理活性更强，在免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗癌、抗肝损伤等方而具有良好的应用前景。但目前一些方而研究水平相对简单，主要表现在研究对象多为粗多糖，杂质较多，难以在分子水平上阐述其药用机理，并且多糖分子结构难以准确得出。铁皮石斛多糖与其它石斛多糖的专属性鉴别研究较少，质量难以控制。因此，铁皮石斛多糖的纯化工艺以及专属性鉴别研究应该是今后的研究方向，以确保铁皮石斛多糖产品的质量。

发明内容

为了克服现有技术存在的不足，本发明提供一种铁皮石斛精制多糖及其制备方法。

本发明所述铁皮石斛，均为兰科植物Dendrobium officinale的茎。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种如式Ⅰ所示的铁皮石斛精制多糖

式Ⅰ。

本发明还提供上述式Ⅰ所示的铁皮石斛精制多糖的制备方法，包括如下步骤：

(1)将铁皮石斛茎，加水，80℃提取2h，提取两次，浓缩，加入95％乙醇，4℃下醇沉48h，离心分离沉淀，冷冻干燥得到铁皮石斛多糖粗品；

(2)将步骤(1)所得的铁皮石斛多糖粗品溶于去离子水，加入氯化717阴离子交换树脂进行脱色，脱色后溶液离心取上清液，加入氯仿、正丁醇充分摇匀并震荡，离心除去出现的沉淀。重复多次加入氯仿、正丁醇的操作直至离心后无沉淀产生；冷冻干燥得到除蛋白样品；

(3)取步骤(2)所得的除蛋白样品溶于去离子水，0.45μm滤膜过滤除杂，上DEAE-52纤维素层析柱，用280ml去离子水进行洗脱，流速1ml/min，收集洗脱液，用3500Da透析袋进行透析1天，浓缩，冷冻干燥，得到初步纯化多糖；

(4)取步骤(3)所得的初步纯化多糖溶于去离子水，0.45μm滤膜过滤除杂，上Sephadex G-100凝胶层析柱，用100ml去离子水洗脱，流速0.5mL/min，弃去先流出的50ml，收集后流出的50ml，用3500Da透析袋进行透析1天，浓缩，冷冻干燥，即得铁皮石斛精制多糖。

与现有技术比较，本发明的方法具有以下优点：

本发明的铁皮石斛精制多糖具有良好的抗氧化活性，尤其清除羟自由基能力良好。

附图说明

图1为DOP的HPLC-GPC图。

图2为DOP衍生化后HPLC图。

图3为DOP红外光谱图。

图4为DOP的¹H-NMR谱。