[发明专利]人CDK13发育缺陷综合症小鼠模型及其制备方法和用途

说明书

一种人CDK13发育缺陷综合症小鼠模型，其基因型为Cdk13^+/‑或者Cdk13^‑/‑。还提供了上述小鼠模型的制备方法，包括一个构建Cdk13 flox小鼠的步骤，一个制备Cdk13^+/‑敲除小鼠的步骤；将Cdk13^+/‑雄鼠与Cdk13^+/‑雌鼠交配，获Cdk13^‑/‑小鼠。还提供了上述人CDK13发育缺陷综合症小鼠模型在筛选用于治疗人CDK13发育缺陷综合症的药物中的用途。本发明还提供了SAHA在制备治疗人CDK13发育缺陷综合症的药物中的用途。本发明人建立了一种遗传稳定、表型与人CDK13发育缺陷综合症吻合的小鼠模型，可用于研究Cdk13基因的生物学功能，也可用于筛选新药及其它治疗方法。

技术领域

本发明属于生物工程领域，涉及一种小鼠模型，尤其涉及一种基因敲除小鼠，具体来说是一种人CDK13发育缺陷综合症小鼠模型及其制备方法和用途。

背景技术

细胞周期蛋白依赖性激酶13(CDK13)是一种从酵母到人类都高度保守的丝氨酸/苏氨酸磷酸激酶(Bartkwiak et al.,2010)，通过和Cyclin K形成复合物从而催化RNA聚合酶II蛋白C端Ser2位点发生磷酸化(Blazek et al.,2011； Greifenberg et al.,2016)。CDK13也参与转录调控(Blazek et al.,2011； Pan et al.,2015；Greifenberg et al.,2016)，RNA可变剪接(Berro et al., 2008；Liang et al.,2015)和轴突的延伸(Chen etal.,2014)。

通过人外显子组测序发现CDK13蛋白保守的丝氨酸-苏氨酸催化结构域内一系列错义突变和先天性心脏病、智力障碍和发育缺陷等相关(Sifrim et al., 2016)。另一个包含4293例发育异常患者的大规模外显子组测序也发现CDK13的突变(Mcrae et al.,2017)。进一步的基因和表型特征也验证了这些突变，并且定义了这种综合征的各种新的临床特征，例如面部及指端异常，智力障碍和发育迟缓，被称之为CDK发育缺陷综合症(Bostwicket al.,2017；Hamilton et al., 2018；Akker et al.2018)。

但目前尚不知晓CDK13突变是否直接导致这种发育缺陷综合症，也不清楚导致表型缺陷背后的机制。因此建立相应的小鼠模型来研究确立CDK13突变与患者中缺陷综合征的关系与机制，从而为该疾病的治疗提供潜在线索，就显得尤为重要。

发明内容

本发明目的在于提供一种人CDK13发育缺陷综合症小鼠模型及其制备方法和用途，所述的这种人CDK13发育缺陷综合症小鼠模型及其制备方法和用途要解决现有技术中没有合适的动物模型来研究人CDK13发育缺陷综合症，同时要解决现有技术中用于治疗人CDK13发育缺陷综合症的药物效果不佳的技术问题。

本发明提供了一种人CDK13发育缺陷综合症小鼠模型，为Cdk13^+/-或者 Cdk13^-/-。

本发明还提供了上述人CDK13发育缺陷综合症小鼠模型的制备方法，包括如下步骤：

1)一个构建Cdk13 flox小鼠的步骤，将Cdk13第三、四外显子两侧分别带有 LoxP位点的Cdk13^{tm1a(EUCOMM)Hmgu} ES细胞株扩增后注射进野生型小鼠囊胚，通过胚胎移植，获得F0代小鼠，F0代小鼠再与野生型小鼠交配，繁育获得F1代小鼠，其基因型为Cdk13^F/+,所述的F1代小鼠在第三、四外显子两侧分别带有 LoxP位点的Cdk13 flox小鼠，即Cdk13 flox小鼠；