[发明专利]一种芦荟苦素的纯化方法

说明书

本发明涉及一种芦荟苦素的纯化方法，以解决梯度洗脱分离耗时较长，重复树脂柱纯化时成本较大的问题。该芦荟苦素的纯化方法，主要步骤为：将库拉索芦荟鲜叶粉碎，并用乙醇提取，加入超级氧化物歧化酶进行酶解，将溶液加热提取，并浓缩至浸膏；用AB‑8树脂制成混合拌料，装柱并冲洗柱子进行纯化，浓缩冲洗液直至干燥；然后用乙醇加热溶解、过滤杂质后，将溶液在冷冻条件下结晶两次，再用纯净水冷冻结晶，将沉淀进行冷冻干燥；冷冻干燥后的白色粉末粉碎即得芦荟苦素。

技术领域

本发明涉及一种纯化方法，具体涉及一种芦荟苦素的纯化方法。

背景技术

芦荟是一种具有较高经济价值和药用价值的植物资源，应用范围也越来越广。芦荟苦素是芦荟中的一种C-糖苷-5-甲基色酮，一种具有很大开发潜力的天然活性物质，实验证明芦荟苦素对实体瘤有非常强烈的抑制作用，芦荟苦素的研究与开发对推动我国芦荟产业的健康发展具有重要的意义。

现有公开文献对精制纯化芦荟苦素的方法并不多，目前芦荟苦素的纯化方法通常提取过程复杂，芦荟苦素在热溶液中颜色容易变深，且不能获得较高纯度的芦荟苦素。

为解决上述问题，公开号为CN 102584807 A的专利公开了一种芦荟苦素的乙醇浸提工艺，主要包括以下步骤：原料芦荟颗粒用80%-95%的乙醇溶液浸取，60℃减压回收乙醇，并浓缩至0.5-0.8mg/ml的浓缩液；分别用等体积的石油醚、乙酸乙酯各萃取3-4次除杂后，60℃减压浓缩除去微量残留的有机溶剂；将得到的芦荟苦素水溶液上样至大孔吸附树脂柱用去离子水冲洗、3%-10%的乙醇溶液洗脱，通过对洗脱液进行制备色谱分离收集芦荟苦素富集的部分。

华东理工大学杨月红发表的论文《芦荟苦素的提取与分离纯化工艺研究》从芦荟鲜叶中提取芦荟苦素的工艺为：清洁芦荟叶片，剥取表皮及维管束部分，粉碎成细小颗粒，按1：3.5料液比加入95%的乙醇，水浴60℃，搅拌，提取70min后过滤，将滤渣按相同提取条件再次提取，共提取两次。合并上清液，60℃蒸发回收乙醇，然后用石油醚、乙酸乙酯萃取除杂，大孔树脂柱纯化后，芦荟苦素含量从0.3%‰左右提高至9.58%左右，收率约为87.2%。HZ-830树脂对芦荟苦素分离纯化的最佳工艺条件：25℃下，将质量浓度为0.5-0.8 mg/ml的芦荟苦素水溶液以2BV/h上样10BV后，再分别用6BV的水和4BV的5%的乙醇洗脱，洗脱流速为3BV/h。操作后纯度约由9.6%提高到56.01%，回收率为75.9%，二次上柱纯化后，芦荟苦素的含量由56.01%提高到80.8%，回收率为66.5%。洗脱液蒸干后用无水乙醇溶解结晶得到高纯度的芦荟苦素(纯度为95%左右)。

上述两种方法虽然可以都可以获得高纯度的芦荟苦素，但其中的工艺中仍存在以下问题：

梯度洗脱分离问题：梯度洗脱耗时较长，同时需耗费大量溶液，且有效成分收率比较低，所用的制备色谱价格昂贵一般工厂难以承担。

重复树脂柱纯化问题：进行两次柱体系，成本比较大；而且后续用乙醇结晶，由于芦荟苦素容易与乙醇结合，所以提取物中乙醇极易超标。

发明内容

本发明的目的是提供一种芦荟苦素的纯化方法，以解决梯度洗脱分离耗时较长，重复树脂柱纯化时成本较大的问题。

为实现上述目的，本发明的技术解决方案是：

一种芦荟苦素的纯化方法，其特殊之处在于：包括以下步骤；

S1，将库拉索芦荟鲜叶粉碎，并用乙醇提取；

S2，加入超级氧化物歧化酶进行酶解；

S3，将溶液加热提取两次，过滤除去滤渣，并浓缩滤液至浸膏状；

S4，将浸膏状的提取物与AB-8树脂制成混合拌料，将混合拌料与树脂装柱，并用乙醇冲洗柱子进行纯化；