[发明专利]一种基于光透射结果分析的芯片比色检测方法

说明书

本发明公开了一种基于光透射结果分析的芯片比色检测方法。该方法包括：将反应剂溶液滴加在芯片载体上，得到检测芯片；按浓度梯度配制不同浓度的标准检测物溶液；将不同浓度的标准检测物溶液分别滴加在检测芯片的检测区域上，显色，测量透射光，将透射光值与标准检测物溶液的浓度值之间的关系建立标准曲线，得出对应的标准曲线方程；将待测样品溶液滴加在检测芯片的检测区域上，显色，测量透射光，数值化读取待测样品的透射光值，将待测样品的透射光值数据代入标准曲线方程中，计算得到所述待测样品的浓度。该方法步骤简单，易于操作，能改善由于颜色强度的饱和问题造成高浓度检测物的分析结果不准确问题，可广泛应用于生物、化学等检测领域。

技术领域

本发明属于生物化学检测领域，具体涉及一种基于光透射结果分析的芯片比色检测方法。

背景技术

比色法是通过比较或测量有色物质颜色强度来确定待测组分含量的方法。比色法作为一种定量分析的方法，该方法以生成有色化合物的显色反应为基础，在分析芯片上的应用一般包括以下步骤：首先是在分析芯片上使显色试剂与不同浓度的待测物标准溶液反应，形成颜色逐渐递变的标准色，然后将待测组分与显色试剂也在完全相同条件下显色，根据反应产生颜色的强度找出与标准溶液最相近的那一份标准，计算确定试样中待测组分的含量。

在芯片分析检测领域，比色法是应用最广泛的分析方法之一，它由于操作简单和易于直接读取结果，提供了一个直观的方法来快速量化目标分析物。目前，比色法在环境监测、核酸检测、食品分析、法医检测等方面的应用越来越有吸引力，已广泛应用于酶、金属离子、蛋白、核酸、抗体、DNA、病原体、葡萄糖、尿酸、亚硝酸根离子以及其他各种疾病标记物的检测。

比色检测方法在芯片上定量或半定量分析的实际应用主要基于光反射结果分析实现的，通过在芯片上添加指示剂或者底物溶液，然后添加不同浓度的待测物标准溶液使之反应显色或使原芯片的颜色褪色，待反应完成后，通过扫描仪或者手机、相机设备采集结果图片，最后在电脑软件中测量色块的颜色强度，并将结果进行处理，得到颜色强度与待测物浓度相关的标准曲线，或者直接将结果图片作为比色卡，在以同样的方法，待测样品与对应的指示剂和底物反应后，将其反应结果与标准曲线进行比对，或以裸眼法进行比色，从而得到待测样中目标检测物的含量。

公开号为CN 104677896 A公开了“一种用于比色分析的纸基微流控芯片的制备及应用”，该发明制作了用于比色分析的纸基微流控芯片，并将该芯片应用于六价铬的检测，通过对检测区进行反应剂的预处理，然后添加待测铬酸钾溶液，待显色稳定后，用扫描仪扫描显色结果并在Photoshop中获取M值，得到反应后颜色强度和六价铬浓度的变化曲线。

公开号为CN 105044101 A公开了“一种基于裸眼目视比色的农药残留速测卡”，该发明设计的速测卡基于碘化硫代乙酰胆碱被乙酰胆碱酯酶水解的产物可使检测条上色带退色,而某些农药对乙酰胆碱酯酶的活性有抑制作用的原理，通过比较检测条上色带的退色条数,即可半定量的检测残留农药。本发明的速测卡基于比色检测，以裸眼法进行结果比对，从而实现蔬菜、水果、土壤等样品中农药残留的半定量测定。

公开号为CN 105973879 A公开了“一种汞离子检测用的纸芯片比色分析系统及其构建方法和应用”，该发明构建了一种汞离子检测用的纸芯片比色分析系统，通过铂纳米颗粒催化TMB/H₂O₂显色反应，用数码相机或者智能手机对各纸芯片的颜色结果拍照并记录保存,得到若干份颜色深浅程度呈梯度变化的纸芯片，直接用于肉眼比色分析。或结合可以发射激光和接收反射激光的光纤分析设备,精确读取纸芯片系统的颜色强度，最终实现溶液中汞离子识别和定量。