[发明专利]一株产复合酶枯草芽孢杆菌,组合物及其应用

说明书

本发明提供了一株枯草芽孢杆菌，含该菌的益生菌剂组合物以及枯草芽孢杆菌和其益生菌剂组合物在发酵棕榈粕中的应用。本发明还提供制备发酵饲料益生菌剂组合物的方法。本发明还提供了通过紫外线诱变育种筛选获得高产β‑甘露聚糖酶、蛋白酶和β‑葡聚糖酶枯草芽孢杆菌突变株的方法。本发明提供的枯草芽孢杆菌不仅产生的β‑甘露聚糖酶、β‑葡聚糖酶和蛋白酶活性高，同时对大肠杆菌具有较强的抑制作用。采用含该菌株的益生菌剂及其组合物发酵棕榈粕，可显著提高发酵样品的粗蛋白、小肽和氨基酸含量高，同时产生较高的β‑甘露聚糖酶、β‑葡聚糖酶和蛋白酶活性，并可部分替代豆粕用于饲养动物。

技术领域：

本发明属于生物饲料领域，具体地说涉及一种枯草芽孢杆菌，以及该枯草芽孢杆菌的产复合酶性能，和其在发酵棕榈粕等饲料中的应用。

背景技术：

棕榈粕(PKE/PKC)是棕榈仁脱壳榨油的过程中提取的副产物，可通过有机溶剂法或机械法获得(Lga O,等.Applied Biochemistry and Biotechnology,2004,118(1-3):73-79)。PKC的含油量、粗蛋白及粗纤维含量较高，平均约10％和14.4％，可为饲用提供充足的代谢能量来源；PKC还含有丰富的矿物质元素如钙、磷、铁、锌等，以及B、E族维生素(Amustaff A B,等.ASEAN food journal,1991,6(3):102-103)；更多研究表明，PKC富含亚油酸，以及甘氨酸、谷氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸等氨基酸(Siew W L等.PorimTechnology,1989,14:2-3)。同时，其具有含水量低，无黄曲霉毒素污染等特点，适用于水产、禽类、反刍类等各种畜牧养殖，常温、通风和干燥条件下可存放7～10个月(李玉鹏,等.饲料研究,2018,43(02):15-18)。然而，PKC的纤维含量相对较高(纤维素：11.6％；半纤维素类：57.8％的甘露聚糖和3.7％的木聚糖)，其中最主要的抗营养因子——甘露聚糖，与水接触呈凝胶状，增加了食糜的粘度，阻碍了动物对营养物质的消化和吸收(Suraini A A,etal.Asian Journal of Scientific Research,2008,1(4):385-393.)。已有研究表明，通过β-甘露聚糖酶处理PKC，可降低其非淀粉多糖含量，提高消化吸收率；酶解产生大量功能性低聚寡糖，繁殖增加益生菌，产生维生素，提高动物免疫力等。有效提高了PKC的营养价值和能量利用率，提高经济效益(Sundu B,Kumar A,et al.World’s Poultry ScienceJournal,2006,62(6):316-325.)。

麸皮是一种广泛使用的常规饲料原料。小麦麸中的阿拉伯木聚糖、β-葡聚糖和纤维素等抗营养成分大大降低了饲料消化利用率，严重时甚至引起畜禽生产性能、胴体质量下降。因此，在含有小麦麸的饲料中常通过添加木聚糖酶、纤维素酶和β-葡聚糖酶来提高饲料利用率。(李玉林，等。中国畜牧杂志，2012，48(8))。

在动物饲料中添加微生物酶制剂，其可以补充动物内源酶的缺乏，并降解特定的饲料成分，在某种程度上调节了原始的消化系统和动物的消化能力，提高饲料利用率，节省饲料资源，无毒副作用(冯定远.饲料工业,2011,566(17):1-5.)，无药物残留和耐药性等不良影响，绿色环保。饲用酶制剂包括单一酶制剂和复合酶制剂两类，其中复合饲用酶制剂的市场应用前景更广阔，主要分为以下两种：(1)通过混合几种单一酶制备的饲料酶制剂；(2)由能够产生多种酶系统的单一微生物制成的饲料酶制剂(郭珺,等.饲料研究,2011,64(02):30-32.)，后者因不用考虑多菌种的协同和复配作用而具有更好的发展前景。