[发明专利]一种牛奶外泌体的特征性标志物及鉴定牛奶外泌体的方法

说明书

本发明公开了一种牛奶外泌体的特征性标志物及鉴定牛奶外泌体的方法，所述标志物为N‑连接糖链，所述N‑连接糖链的分子量和结构式为1599.5656(Man)₅(Gal)₁(GlcNAc)₃以及2192.8088(Fuc)₁(Man)₃(Gal)₂(GlcNAc)₆。本发明筛选得到了2种可靠的牛奶外泌体特征性N‑连接糖链结构作为牛奶外泌体的标志物，利用该2种特征性N‑连接糖链能够实现简便、快速的鉴定外泌体，对于临床靶向载药的研究具有实际意义。

技术领域

本发明属于牛奶外泌体鉴定技术领域，具体涉及一种牛奶外泌体的特征性标志物及鉴定牛奶外泌体的方法。

背景技术

外泌体是由几乎所有哺乳动物细胞类型，包括肥大细胞、树突细胞、B淋巴细胞、上皮细胞、内皮细胞、脂肪细胞和神经元等分泌的约30-150nm的生物纳米囊泡。目前研究已经确定外泌体可以通过在许多生物过程中递送功能性货物如蛋白质、mRNA和微小RNA(miRNA)并促进细胞通讯。外泌体不仅在正常生理过程中如免疫反应、细胞增殖、炎症、哺乳和神经元功能中发挥着不可替代的作用，还在疾病进展的不同阶段，如肝病、神经退行性疾病和严重的肿瘤相关疾病中行使功能。外泌体在生理条件和病理条件下的各种组份可作为治疗靶标，也可在疾病中作为药物或基因递送载体，而牛奶外泌体因为其生物来源和较易获得的优势具有成为完美的靶向药物载体的潜力，并且外泌体靶向载药的机制可能是通过外泌体表面糖蛋白与靶向细胞的特异性识别，因此牛奶外泌体表面N-连接糖链的分析对研究外泌体靶向载药机理至关重要。

虽然目前外泌体领域发展迅速，但仍存在着许多障碍，例如分离方法不规范，对分离到的外泌体表征方法繁琐，耗时长，没有质量较好的外泌体特征性标志物等，因此对牛奶外泌体进行解析，寻找特征性标志物，为快速、简便鉴定牛奶外泌体提供一种新方法，对于临床靶向载药的研究具有实际意义。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

鉴于上述的技术缺陷，提出了本发明。

因此，作为本发明其中一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供一种牛奶外泌体的特征性标志物。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种牛奶外泌体的特征性标志物，其中：所述标志物为N-连接糖链，所述N-连接糖链的分子量和结构式为1599.5656(Man)₅(Gal)₁(GlcNAc)₃以及2192.8088(Fuc)₁(Man)₃(Gal)₂(GlcNAc)₆。

作为本发明的另一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供一种鉴定牛奶外泌体的方法。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种鉴定牛奶外泌体的方法：对牛奶外泌体的N-连接糖链进行质谱检测，验证牛奶外泌体的特征性N-连接糖链作为外泌体标志物。

作为本发明所述的鉴定牛奶外泌体的方法的一种优选方案：所述N-连接糖链，其分子量和结构式为1599.5656(Man)₅(Gal)₁(GlcNAc)₃以及2192.8088(Fuc)₁(Man)₃(Gal)₂(GlcNAc)₆。

作为本发明所述的鉴定牛奶外泌体的方法的一种优选方案：所述对牛奶外泌体的N-连接糖链进行质谱检测，还包括对所述N-连接糖链进行修饰后进行质谱检测。