[发明专利]一种鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血的复合扩增体系及其使用的引物组合

说明书

本发明公开了一种鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血的复合扩增体系及其使用的引物组合。该引物组合由序列表中的序列1至序列12所示的12种DNA分子组成。采用该引物组合构建复合扩增体系，可以鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血，且准确性较高。本发明为明确案件性质和定罪量刑等提供准确的科学依据，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于法医技术学领域，具体涉及一种鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血的复合扩增体系及其使用的引物组合。

背景技术

通过鉴别案发现场体液斑迹的组织来源，可推断样本组织来源及其真实犯罪活动，从而为案件定性及现场重建提供重要信息，为法庭科学提供重要的科学证据。案件现场常见的体液包括外周血、月经血、唾液、精液、阴道分泌液等。其中，外周血和月经血虽然均含有大量红细胞，但与外周血相比，月经血中还含有大量的子宫内膜碎片、子宫颈粘液和阴道分泌物等混合物。现场血液类检材是属于外周血还是月经血是非常重要的法庭科学问题，往往对案件定性及重建案发现场、提供法庭证据具有十分重要的意义；尤其是针对性侵案件、女性失踪案以及某些伤害案中，女性受害者称因受暴力攻击出现血尿，在这种情况下，需要确定尿液中的血细胞来源是否存在月经血污染。因此，月经血与外周血的两种血液类体液间的鉴别区分仍是法医学体液鉴别的重点及难点。传统的血痕鉴定方法主要是生化和免疫学分析法，即利用血液中的血红蛋白及其衍生物进行鉴别，但此类方法不仅费时费力，而且非常消耗检材，容易出现假阳性或假阴性结果。从犯罪现场中获取的微量检材亟需一种更为灵敏、准确的鉴定方法进行鉴别。

大量研究表明，基于分子生物学水平的mRNA标记检测有望成为体液斑迹组织属性来源鉴定的有效方法。该方法依赖于不同体液中mRNA的独特表达谱来鉴定体液，具有特异性强、灵敏度高、只需要微量检材等优势，并且兼容当前的DNA/RNA共提技术，即从生物检材中同时提取DNA和mRNA，其中DNA用于多态分型，mRNA用于组织来源鉴定，既可提高工作效率，又使微量检材得到充分利用。欧洲DNA分型小组的研究表明，在没有RNA检测经验的实验室中依然可以用mRNA分析方法成功鉴定血迹，将不同体液混合后，进行RT-PCR复合扩增，成功获得各体液组织特异性的mRNA基因位点检测结果，并对体液来源进行了准确判断。

发明内容

本发明的目的是鉴定待测体液为非血液、月经血还是外周血。

本发明首先保护引物组合，可包括引物组合甲和引物组合乙。

所述引物组合甲可包括引物1、引物2、引物3和引物4；

所述引物1可为序列表中的序列1所示的单链DNA分子；

所述引物2可为序列表中的序列2所示的单链DNA分子；

所述引物3可为序列表中的序列3所示的单链DNA分子；

所述引物4可为序列表中的序列4所示的单链DNA分子。

所述引物组合乙可包括引物5、引物6、引物7和引物8；

所述引物5可为序列表中的序列5所示的单链DNA分子；

所述引物6可为序列表中的序列6所示的单链DNA分子；

所述引物7可为序列表中的序列7所示的单链DNA分子；

所述引物8可为序列表中的序列8所示的单链DNA分子。

所述引物1、所述引物3、所述引物5和所述引物7均用荧光标记。

所述引物1、所述引物3、所述引物5和所述引物7的5’末端均用荧光标记。

所述荧光标记具体可为FAM标记。

所述引物组合甲具体可由所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4组成。