[发明专利]一种以潘氏冰灯玉露花序轴为外植体的组织培养方法

权利要求书

1.一种以潘氏冰灯玉露花序轴为外植体的组织培养方法，其包括如下步骤：

步骤A）外植体选择与消毒；

所述外植体选取玉露盛花期的花序轴；

所述步骤A）中的消毒方法为：将外植体用流水冲洗30min后，于无菌操作台上用75%乙醇消毒30s，再用0.1%的升汞消毒8min，最后用无菌水洗涤6次，每次洗1min，用无菌纸吸干表面水分，获得消毒外植体；

步骤B）愈伤组织的诱导：取消毒后的外植体切分为2.0cm长的小段，接种于愈伤诱导培养基中进行诱导培养；

所述愈伤诱导培养基的配方为：MS+6-BA 1.5mg/L +NAA0.3 mg/L；

所述诱导培养的条件为：诱导培养温度在24-26℃，首先在黑暗中培养24h，然后进行正常培养20-35天；所述正常培养的条件为：光照时间10-14h/天，光照强度为1600-1800lx；

步骤C）愈伤组织的分化：将步骤B）中所得愈伤组织切割后接入继代分化培养基中进行诱导不定芽，继代培养25-30天，培养温度25±2℃，光照时间10-14h/天，光照强度为1600-1800lx；

所述继代分化培养基的配方为：MS+6-BA 0.5mg/L；

步骤D）壮苗培养：将步骤C）所得玉露丛生芽切为单芽后，接入壮苗培养基中进行培养25-30天，培养温度25±2℃，光照时间10-14h/天，光照强度为1600-1800lx；

所述壮苗培养基的配方为：MS+IBA0.2 mg/L；

步骤E）根的诱导：将步骤D）所得玉露组培苗接入生根培养基中进行生根培养20天，培养温度25±2℃，光照时间10-14h/天，光照强度为1600-1800lx；

所述生根培养基的配方为：MS+IBA0.2 mg/L；

步骤F）炼苗驯化：将步骤E）获得的组培幼苗，栽入带有基质为体积比1:1珍珠岩：草炭土的容器内，移栽前基质喷施杀菌剂。

2.根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于，所述杀菌剂为浓度为（1-5）×10⁸cfu/L的多粘类芽孢杆菌液。