[发明专利]大鼠非暴露式气管滴注方法

说明书

大鼠非暴露式气管滴注方法，步骤如下：1，制作插管；2，麻醉；3，固定；4，气管插管；5，滴注；6，注气；7，复苏。本发明提供的大鼠非暴露式气管滴注方法中，气管插管操作简单易上手，成功率高，对器械和设备的要求较低，无需使用昂贵设备，受试大鼠在气管插管及滴注过程中受伤的概率较小，可广泛应用于呼吸道给药或染毒试验以及各种疾病模型的建立。

技术领域

本发明涉及呼吸系统疾病实验研究领域，特别是一种大鼠非暴露式气管滴注方法。

背景技术

大鼠气管滴注技术常用于大鼠气管给药、大鼠气管给药造模、大鼠肺功能测定以及与呼吸系统疾病相关的实验研究。大鼠相关模型复制以及大鼠肺功能检测时均要进行气管滴注，气管滴注技术直接影响动模型复制的成功率以及肺功能检测的成败，在整个实验过程中非常关键。

气管滴注是一种通过气管插管将药物输送进入肺部的方法，相较于气管插管给药，其无需通过手术切口暴露气管，对给药主体的伤害较小。对于较大的动物(如兔子或狗)，使用标准的儿科喉镜即可完成气管滴注操作。但对于大鼠而言，由于其特殊的口腔、咽部解剖学情况，目前还没有标准的插管设备可供大鼠使用，通常需要调整其它物种使用的器械，且需要专业的培训才能上手操作，实际操作难度较大，插管成功率难以得到保障。

目前，评价大鼠气管插管是否成功的方法主要有以下几种：1、用镜子放在插管前端，检查大鼠呼气时镜子上是否形成雾气；2、将插管连接到啮齿动物肺部呼吸机，观察大鼠胸廓是否会随机械通气有规律的起伏；3、将一滴水滴注在延长管(静脉留置针软管)中，并连接到插管末端，观察延长管中的水是否随大鼠呼吸同步震荡；4、构建一个自动视频滴注器(AVI)来可视化评估插管是否成功；5、在插管口粘接固定一根大鼠纤毛，观察大鼠纤毛是否随大鼠呼吸而摆动。

上述方法分别存在以下不足之处：方法1中，镜子上的雾气通常消散的较快，导致该方法并不可靠；方法2中，啮齿动物肺部呼吸机价格昂贵，大部分实验室中没有该设备，导致该方法难以普及；方法3中，操作步骤较为繁琐，相较于其它方法，评价所需时间较长；方法4中，构建一个自动视频滴注器(AVI)需要昂贵的硬件设备支持，大部分实验室中没有相应设备，导致该方法难以普及；方法5中，由于大鼠的插管内径较小，且大鼠呼吸时的通气量较小，大鼠纤毛的摆动幅度很小，肉眼难以观察，导致该方法并不可靠。

综上所述，研究出一种操作简便、成功率高、对昂贵设备要求较低的大鼠气管滴注方法，及一种操作简便、可靠性好、对昂贵设备要求较低的大鼠气管插管成败评价方法，具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，而提供一种大鼠非暴露式气管滴注方法。它解决了现有的大鼠气管滴注操作中，气管插管难度较大，插管成功率较低、难以判断气管插管是否成功的问题。

本发明的技术方案是：大鼠非暴露式气管滴注方法，步骤如下：

S01，制作插管：选用9号一次性无菌注射针头，将9号一次性无菌注射针头的尖端磨至圆钝，在距离其磨至圆钝的一端10mm处进行弯折，弯折角度a为14～16°，将其命名为大鼠气管插管，大鼠气管插管一端为出液端，另一端为针筒连接端；

S02，麻醉：选取成年大鼠，使用乙醚对其进行麻醉，以其肌肉松弛、眼睑闭合反射消失、使用有齿镊捏夹皮肤或脚趾无收缩反应即进入下一步骤；

S03，固定：将麻醉后的大鼠在手术台上摆放至仰卧位，将其上切牙用橡皮筋、四肢用棉线绳固定在手术台上；