[发明专利]一种组织修复材料及其制备方法

说明书

本发明属于医用修复材料领域，涉及一种用于组织修复的去细胞医用材料及其制备方法。本发明的创新点在于，使用种畜结缔组织或器官，这比来自商品肉畜的材料，具有更强的韧性和更好的稳定性；同时避免了交联的麻烦和化学试剂的残留。另外发明方法中，采用植物源非离子表面活性剂作为去细胞试剂，避免了化学去污剂、蛋白酶制剂等对ECM立体结构的损坏和ECM中有效活性成份的较多流失；不仅能较好维护ECM立体三维结构，并且能让ECM存留较多的有效生物活性成份。采用此方法制得的去细胞材料，不仅具有较好的稳定性和力学性能；而且因有效活性成份含量高，诱导组织再生能力强。

技术领域

本发明涉及组织修复材料，具体涉及一种去细胞组织修复材料及其制备方法。

背景技术

现在临床上用于组织修复的医学生物材料，正从传统的不可吸收材料，向天然、可降解、而且能够主动诱导组织再生的新型生物材料变革；而基于组织工程学原理，以动物组织为原料，去除组织中的细胞，保留较完整的细胞外基质(Extracellular Matrix，ECM)，以此为原料制备的去细胞医用材料，用于组织修复和再生，是今后外科医学的一个主要发展方向。

去细胞ECM通常具有立体三维结构，并含有各类大分子物质如胶原蛋白、弹性蛋白、糖胺聚糖（包括透明质酸等）、生长因子等多种成分，能为细胞的生存及生长提供适宜的场所和微环境，并能够参与调节各种细胞的生长、表型表达、形状形成、新陈代谢、迁移、增殖和分化，进而调控组织和器官的功能。去除动物组织中的细胞成分，以及其他免疫原性成份，保留其他ECM中的有效成分，能够开发出较理想的组织修复材料，行业内称作组织源去细胞医用材料；目前已有不少这类去细胞基质材料，在硬膜损伤、腹壁修复、烧伤、盆底修复、肌腱修复、神经修复等领域成功进入临床应用。

理想组织修复材料应具备下列条件：①具有安全性，无毒性，无感染性。②组织相容性好，无免疫排斥反应。③致密性好，无渗透性。④具有韧性，易牢固缝合。⑤能促使组织再生，不发生粘连。⑥使用方便，手术简单，易于消毒灭菌。⑦取材广泛，价格低廉。⑧不引起急慢性炎症反应。

目前应用较多的组织修复材料，主要是异种去细胞基质，这类医用材料，也称为组织去细胞材料，其初始原料主要来源于猪、牛、羊、马等哺乳动物的小肠粘膜下层、真皮、膀胱粘膜下层、胃粘膜下层、心包膜、脑膜、羊膜、脏器膜、腹膜等组织；通过一系列加工处理，包含重要的工艺步骤如去细胞；有的还采用专门的试剂来进一步去DNA，去α-Gal抗原等免疫原成分。这种方法获得的去细胞基质支架（或称为补片），一方面能够保留三维立体结构，同时也含有一些重要活性成份。由去细胞基质制备而成的理想生物去细胞材料，应具有良好的生物适应性，可降解性、可吸收性；力学强度适宜性，无毒性，无免疫性；能够为宿主细胞的趋化、附着、增殖、分化提供理想的空间支架和适宜的微（营养）环境，有利于靶组织的结构修复和功能重建。在临床应用中，以猪小肠粘膜下层(SIS)制成的去细胞材料是目前产业界和学术界双公认的较理想的组织修复材料，其次是应用较早也较多的是真皮组织（dermal tissue）源医用材料。

对去细胞医学生物材料而言，去细胞工艺是制备优质生物医用材料中的第一大技术难点。其直接关系到去细胞医用材料的质量，即去细胞医用材料的有效性和安全性。如果去细胞不彻底，则会导致去细胞医用材料仍残留有动物源细胞，则导致具有较强的免疫源性，会引起免疫排斥反应和炎症，如补片植入后易发生浆液肿等不良反应，存在一定的安全隐患；另一方面，如果为了充分保证将从组织中的细胞彻底去除干净，往往会使用去细胞作用方式较猛烈的试剂，或者是长时间地将去细胞液与组织反复作用（如浸泡、振荡、灌注等），这样会导致不同程度地影响ECM天然的三维结构稳定性，破坏ECM中的各类生长因子的功能结构域(如成纤细细胞生长因子、转化生长因子，血管内皮生长因子等)，同时还会引起活性成份（如透明质酸HA等）的损耗和流失。