[发明专利]脐带间充质干细胞条件培养基的用途

说明书

本发明涉及脐带间充质干细胞条件培养基的用途，具体地，本发明涉及人脐带间充质干细胞条件培养基或由其制得的冻干粉对于卵巢损伤、卵巢衰老等的保护作用。

技术领域

本发明涉及脐带间充质干细胞条件培养基的用途，具体地，本发明涉及人脐带间充质干细胞条件培养基或由其制得的冻干粉对于卵巢损伤、卵巢衰老等的保护作用。

背景技术

干细胞是一类具有自我复制能力及多向分化潜能的未分化的细胞,具有再生人体各种组织器官的潜在功能，因此又被医学界称为“万能细胞”。多项研究证实干细胞在特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，不仅如此，干细胞经过连续传代培养和冷冻保存后仍能保存最初的多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于抵抗衰老、器官移植、疾病治疗以及免疫系统自身修复等方面。近年来，干细胞移植治疗卵巢功能不全已被认为是一项新的有效的治疗措施。骨髓间充质干细胞、脂肪干细胞、羊膜间充质干细胞、脐带间充质干细胞等多种干细胞已被证明可以改善卵巢功能。

然而，直接使用干细胞治疗具有储存和运输不便以及免疫排斥方面的缺点。另外，干细胞容易分化成其它基质细胞，可能促进肿瘤细胞转移和刺激上皮-间质细胞转化。

间充质干细胞分泌的微囊泡和外泌体中含细胞因子、生长因子、miRNA、mRNAs等多种成分。这些因子可短期或长期参与细胞交流、细胞信号转导、细胞或组织代谢改变等生理过程中。体外培养间充质干细胞时，微囊泡及多种蛋白质直接分泌到培养基中，称为条件培养基(conditioned medium,CM)。目前尚没有将间充质干细胞的条件培养基用于治疗卵巢功能不全的报道。

发明内容

本发明的发明人出人意料地发现，间充质干细胞特别是人脐带间充质干细胞的条件培养基可用于改善卵巢功能，因而特别适合用于制备治疗卵巢功能不全的药物，由此完成了本发明。

本发明第一方面涉及脐带间充质干细胞的条件培养基用于制备改善卵巢功能的制剂的用途。

本发明第二方面涉及一种用于改善卵巢功能的药物组合物，其包含脐带间充质干细胞的条件培养基或其冻干粉和药学上可接受的载体。

本发明第三方面涉及一种改善卵巢功能的方法，所述方法包括给予有需要的受试者有效量的脐带间充质干细胞培养物的条件培养基或者含有脐带间充质干细胞的条件培养基的药物组合物或制剂的步骤。

以下对本发明的上述方面做详细描述。

在本说明书中，术语“脐带间充质干细胞(Umbilical Cord-derived MesenchymalStem Cells，UCMSCs)”是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，具有高效增殖和多向分化潜能，在特定条件下可向骨、软骨、神经和心肌等多种功能细胞分化。由于UCMSCs易于获得，来源广泛，且遗传背景稳定，已成为再生医学研究和应用的种子细胞之一。研究显示：移植到体内且定向分化的UCMSCs并不能弥补组织器官损伤所丢失的功能细胞，其对组织器官的修复作用主要归因于强大的外分泌功能，其可通过分泌多种细胞因子(如：TGF-β、IGF、FGF、VEGF、HGF等)及细胞间信息物质(如：外泌体和microRNAs等)调控细胞的增殖、分化和代谢等功能。

在本发明的实施方式中，“脐带间充质干细胞条件培养基(UCMSC-CM)”是指体外培养人脐带间充质干细胞时，微囊泡及多种蛋白质直接分泌到培养基中，由此形成的培养液。

在本发明的实施方案中，还包括制备上述条件培养基的方法，该方法包括以下步骤：

1)在适合培养脐带间充质干细胞的培养基中培养人脐带间充质干细胞；

2)当细胞汇合度达到约80％时将培养基弃去，以无菌PBS洗涤细胞；

3)将细胞接种在无血清培养基中，继续培养24小时；