[发明专利]一种生物基质中的靶标代谢物含量的检测方法有效
| 申请号： | 201910772860.X | 申请日： | 2019-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN110361495B | 公开（公告）日： | 2021-07-27 |
| 发明（设计）人： | 王彦;贾孟琪;杨凯歌;王薇薇;闫超;宁慧 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | G01N30/88 | 分类号： | G01N30/88 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 王华英 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生物 基质 中的 靶标 代谢物 含量 检测 方法 | ||
1.一种生物基质中的靶标代谢物含量的检测方法，其特征在于，所述方法包括：
提供一液相色谱串联质谱测试平台，采用多反应检测模式调整质谱参数；
通过所述液相色谱串联质谱测试平台检测所述生物基质，测定所述生物基质中的靶标代谢物含量，其中，所述生物基质通过提取体系进行预处理，所述提取体系包括有机溶剂；
所述生物基质为体液；
所述靶标代谢物和相应的所述质谱参数为：
所述提取体系中所述有机溶剂为体积比选自(30～70):(70～30)的甲醇与二氯甲烷组合，所述有机溶剂与所述体液的体积比为(1～20):1；
所述液相色谱串联质谱的检测条件为：
色谱柱：Acquity UPLC BEH Shield C18色谱柱或Acquity UPLC BEH Shield C8色谱柱；
流动相：使用体积比为50:50的流动相A和流动相B的组合将标准品混合溶液配制成系列梯度工作液，其中，所述流动相A为水，所述流动相B为纯有机相溶液，所述标准品混合液由所述靶标代谢物标准品溶液和所述氘代类内标标准品配置而成；
流速：0.4ml/min；
柱温：50℃；
自动进样器温度：4℃；
检测波长：280nm；
进样体积：10μl；
其中，梯度洗脱表如下：
质谱分析部:三重四极杆；
标准品浓度：1ng/μL；
流量：10μL/min；
其中，MS/MS部中ESI+模式ESI-模式质谱离子源参数如下：
2.如权利要求1所述的生物基质中的靶标代谢物含量的检测方法，其特征在于，所述提取体系中还包括抗氧化剂。
3.一种生物基质中的靶标代谢物含量的检测方法，其特征在于，所述方法包括：
提供一液相色谱串联质谱测试平台，采用多反应检测模式调整质谱参数；
通过所述液相色谱串联质谱测试平台检测所述生物基质，测定所述生物基质中的靶标代谢物含量，其中，所述生物基质通过提取体系进行预处理，所述提取体系包括有机溶剂；
所述生物基质为组织；
所述靶标代谢物和相应的所述质谱参数为：
所述提取体系中所述有机溶剂为体积比选自4:1的甲醇与水组合，所述有机溶剂-组织的质量比为(2～20):1；
所述液相色谱串联质谱的检测条件为：
色谱柱：Acquity UPLC BEH Shield C18色谱柱或Acquity UPLC BEH Shield C8色谱柱；
流动相：使用体积比为50:50的流动相A和流动相B的组合将标准品混合溶液配制成系列梯度工作液，其中，所述流动相A为水，所述流动相B为纯有机相溶液，所述标准品混合液由所述靶标代谢物标准品溶液和所述氘代类内标标准品配置而成；
流速：0.4ml/min；
柱温：50℃；
自动进样器温度：4℃；
检测波长：280nm；
进样体积：10μl；
其中，梯度洗脱表如下：
质谱分析部:三重四极杆；
标准品浓度：1ng/μL；
流量：10μL/min；
其中，MS/MS部中ESI+模式ESI-模式质谱离子源参数如下：
4.如权利要求3所述的生物基质中的靶标代谢物含量的检测方法，其特征在于，所述提取体系中还包括抗氧化剂。
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