[发明专利]一种基于翻译组的环状RNA翻译多肽的检测分析方法在审
申请号: | 201910768511.0 | 申请日: | 2019-08-20 |
公开(公告)号: | CN110556162A | 公开(公告)日: | 2019-12-10 |
发明(设计)人: | 夏昊强;周煌凯;高川;张羽;陶勇;罗玥;陈飞钦;张秋雪 | 申请(专利权)人: | 广州基迪奥生物科技有限公司 |
主分类号: | G16B30/10 | 分类号: | G16B30/10;G16B50/00 |
代理公司: | 44202 广州三环专利商标代理有限公司 | 代理人: | 颜希文;宋静娜 |
地址: | 510000 广东省广州市广州国*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 环状RNA 翻译 序列信息 检测分析 多肽 高通量测序 测序数据 蛋白编码 翻译产物 鉴定结果 样本检测 质量比对 内源性 预测 比对 富集 过滤 样本 基因 证据 分析 | ||
1.一种基于翻译组的环状RNA翻译多肽的检测分析方法,其特征在于,包括如下内容:
S1、将样本高通量测序获得的高质量比对序列进行TopHat比对以及鉴定,将鉴定结果过滤后,获得环状RNA序列信息;
S2、对S1获得的环状RNA序列信息进行ORF注释;
S3、对S1获得的环状RNA序列信息进行IRES预测;
S4、结合ribosome-seq测序数据鉴定内源性circRNA翻译产物;
S5、对单样本检测到S4获得的具有junction reads的circRNA的母基因进行GO和KEGG富集分析。
2.如权利要求1所述的检测分析方法,其特征在于,所述步骤S1中获得的高质量比对序列通过以下方法实现:得到下机数据后,将数据进行过滤、比对核糖体,得到High qualityclean reads。
3.如权利要求2所述的检测分析方法,其特征在于,所述对下机的clean reads进行过滤,其步骤及参数如下:去除含adapter的reads和除含N比例大于10%的reads以及低质量的reads。
4.如权利要求2所述的检测分析方法,其特征在于,所述对下机的得到的High qualityclean reads进行比对核糖体的方法包括以下步骤:首先将高质量比对序列比对到核糖体数据库,去除比对上核糖体的reads。
5.如权利要求1所述的检测分析方法,其特征在于,所述步骤S1中将获得的高质量比对序列进行TopHat比对及鉴定的方法包括以下步骤:将每个样本的高质量比对序列与参考基因组分别进TopHat比对,从比对结果中提取Unmapped Reads,然后截取每一条UnmappedReads的两端,得到Anchors Reads,再用Anchors Reads再一次比对到参考基因组上,将所有样本的比对结果进行合并,将合并后的结果后使用find_circ软件进行环状RNA鉴定。
6.如权利要求1所述的检测分析方法,其特征在于,所述步骤S2中进行ORF注释通过以下方法实现:利用cORF pipeline脚本针对circRNA进行ORF注释,获得注释结果统计图表,寻找具有编码能力能力的circRNA。
7.如权利要求1所述的检测分析方法,其特征在于,所述步骤S3中IRES预测通过以下方法实现:利用IRESfinder搜索真核细胞内RNA的核心IRES区域,采用划窗模式对每一小段的序列进行预测获得评分,得分最高的区域被认为是该circRNA的IRES序列。
8.如权利要求1所述的检测分析方法,其特征在于,所述步骤S4中鉴定内源性circRNA翻译产物通过以下方法实现:将样本的ribosome-seq数据比对参考基因组,截取环状RNAjunction位点的前后juntion序列,寻找可以比对junction位点的reads,找出潜在支持环状RNA翻译的reads,并统计reads数。
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