[发明专利]一种植物酵素的制备方法

权利要求书

1.一种植物酵素的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)取以下重量份的成分，分别粉碎后混合，得到原料浆料：井冈蜜柚7份，芦笋6份，山楂5份，荷叶4份，葛根4份，蛹虫草3份，百香果3份，大米粉2份，水30份；

2)向所述原料浆料中分别加入230U/g的菠萝蛋白酶，480U/g的木瓜蛋白酶，330U/g的阿拉伯呋喃糖苷酶，130U/g的果胶裂解酶，430U/g的环糊精葡萄糖苷转移酶，120U/g的己糖氧化酶，80U/g的无花果蛋白酶，调节pH为7.8，酶解温度45℃，在搅拌状态下酶解360min；而后向其中加入150U/g的麦芽糖淀粉酶，80U/g的木聚糖酶，200U/g的果胶甲基酯酶，调整pH至6.0，酶解温度32℃，在2.5个大气压的环境中酶解180min，得到发酵基质；

3)将卷曲乳杆菌菌粉、肠膜明串珠菌菌粉、比菲德氏菌菌粉、拜耶林克氏菌菌粉、红酵母菌粉按8:15:3:2:2的比例混合，得到混合菌粉；将YPD培养基与MRS培养基按1:3的比例混合，向混合产物中加入乙二胺四乙酸二钠至终浓度0.2g/L，加入低聚果糖至终浓度0.3g/L，加入木糖醇至终浓度0.5g/L，得到复合培养基；

4)将所述混合菌粉接入1/2浓度的麦氏培养基中，混合菌粉与1/2浓度的麦氏培养基之间的比例为每1g所述混合菌粉对应200mL所述1/2浓度的麦氏培养基，培养至OD₆₂₀为0.7，离心弃上清，取沉淀物接入到所述复合培养基中，所述复合培养基与沉淀物的重量比为300:1，继续培养12h，得到培养液；取1kg所述培养液，调整其温度至12℃，以每小时加入20g的频率向其中陆续加入所述发酵基质，直至所加入的发酵基质总量为2kg，停止加入发酵基质，调整温度至35℃，在200rpm转速的搅拌状态下发酵12h；

5)将步骤4)所得产物在5个大气压环境中加热至69℃，保持30min，而后在5min之内将温度降至2℃，保持20min，而后在10min之内将温度升高至72℃，保持3min，冷却至室温，即得到所述植物酵素。

2.根据权利要求1所述的一种植物酵素的制备方法，其特征在于步骤1)中，所述原料浆料中还含有3重量份的牛油果和1重量份的菠菜。

3.根据权利要求1所述的一种植物酵素的制备方法，其特征在于步骤1)中所述的粉碎后混合，是将配方量的井冈蜜柚，芦笋，百香果，山楂分别粉碎后与配方量一半的水混合并搅拌均匀，得到第一混合物；把配方量的荷叶，葛根，蛹虫草，大米分别粉碎后与配方量另一半的水混合并搅拌均匀，得到第二混合物；再将所述第一混合物与第二混合物混合均匀。

4.根据权利要求1所述的一种植物酵素的制备方法，其特征在于步骤2)中，在搅拌状态下酶解360min的过程中，所处环境中氧气浓度不低于20％。

5.根据权利要求1所述的一种植物酵素的制备方法，其特征在于步骤2)中，所述搅拌的转速为200rpm；所述调节pH为7.8，是通过碳酸氢钠实现的；所述调节pH至6.0，是通过柠檬酸实现的。

6.根据权利要求1所述的一种植物酵素的制备方法，其特征在于步骤3)中所述的YPD培养基含有以下重量百分比的成分：1％的酵母膏，2％的蛋白胨，2％的葡萄糖。

7.根据权利要求1所述的一种植物酵素的制备方法，其特征在于步骤3)中所述的MRS培养基包括以下成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g，吐温801mL，乙酸钠5g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，琼脂18g，蒸馏水1000mL；所述MRS培养基的pH为6.6。

8.根据权利要求1所述的一种植物酵素的制备方法，其特征在于步骤4)中所述离心弃上清是在4℃条件下完成的，所述离心的转速为4000rpm。

9.根据权利要求1所述的一种植物酵素的制备方法，其特征在于步骤4)中所述发酵基质先在68℃条件下保持30min，而后再陆续加入至所述培养液中。

10.根据权利要求1所述的一种植物酵素的制备方法，其特征在于步骤5)的降温过程中持续保持2个大气压的压力，升温至72℃后将压力恢复至5个大气压，保持3min，而后恢复常压，冷却至室温；其中用于恢复常压的空气，为无菌空气。