[发明专利]A族链球菌抗原检测试纸条、试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种A族链球菌抗原试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.向胶体金溶液中加入碳酸钾调节pH，再依次加入抗A族链球菌抗体、牛血清白蛋白溶液，离心得到沉淀，沉淀用重悬液重悬得到胶体金标记的抗A族链球菌抗体；

b.将硝酸纤维素膜粘贴于聚氯乙烯底板上，得到贴膜的聚氯乙烯底板，置于室温中，湿度≤30%条件下或加干燥剂室温密封保存备用；

c.用包被液稀释抗A族链球菌抗体得到检测线工作液；用包被液稀释羊抗鼠IgG多抗得到对照线工作液；

d.用步骤a得到的胶体金标记的抗A族链球菌抗体对结合垫进行喷金处理得到免疫结合垫，用步骤c得到的检测线工作液、羊抗鼠IgG多抗对照线工作液分别在步骤b得到的贴膜的聚氯乙烯底板上的硝酸纤维素膜上进行划线处理，划线后置于室温中，湿度≤30%条件下干燥；

e.将样品垫、免疫结合垫、贴膜的聚氯乙烯底板和吸水纸依次组装后切割得到A族链球菌抗原检测试纸条。

2.根据权利要求1所述的A族链球菌抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤a所述的具体步骤是向所述胶体金溶液中加入0.2M碳酸钾，混匀调节pH，然后加入抗A族链球菌抗体混匀后静置30min，再加入含10%牛血清白蛋白的牛血清白蛋白溶液，混匀静置30min，制得混合溶液，将混合溶液于4℃、转速为8000g的条件下离心30min得到沉淀，沉淀用重悬液重悬至所述混合溶液的体积的1/3，即得胶体金标记的抗A族链球菌抗体的溶液。

3.根据权利要求1或2所述的A族链球菌抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤a中，所述碳酸钾为0.1-0.2M的碳酸钾溶液；

所述胶体金溶液的浓度（W/V）为0.01%-0.04%

所述碳酸钾溶液体积与胶体金溶液体积比例为：1-10 uL：1ml；

所述牛血清白蛋白溶液含有10%的牛血清白蛋白；

所述牛血清白蛋白溶液的加入体积为所述胶体金溶液体积的1%-10%；

所述重悬液为50mM 的三羟甲基氨基甲烷溶液；

所述三羟甲基氨基甲烷溶液每100ml含有：1g BSA、0.5g 聚乙烯吡咯烷酮、2g 海藻糖以及4g 蔗糖，pH值为8.5。

4.根据权利要求1所述的A族链球菌抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤c中，所述包被液为0.01M-0.02M的磷酸盐缓冲液，每10mL包被液含有0.2g海藻糖，pH为7；

所述检测线工作液中抗A族链球菌抗体浓度为0.8-1.2mg/mL；所述对照线工作液中羊抗鼠IgG多抗的浓度为0.8-1.2mg/mL。

5.根据权利要求1所述的A族链球菌抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤d中，所述喷金处理和划线处理均通过喷金划膜设备实现；

所述结合垫为玻璃纤维膜。

6.根据权利要求1所述的A族链球菌抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤e中，所述样品垫为玻璃纤维膜；

所述样品垫在使用前，用样品垫处理液对样品垫浸泡后干燥，其中所述样品垫处理液是0.05M的三羟甲基氨基甲烷溶液，每100ml三羟甲基氨基甲烷溶液含有0.5g酪蛋白、0.5g表面活性剂S9以及1.0mL吐温20，pH为8.4-8.6。

7.一种A族链球菌抗原检测卡的制备方法，其特征在于：将权利要求1步骤e获得的A族链球菌抗原检测试纸条置入塑料外壳中，其中，塑料外壳的加样孔在样品垫上方，塑料外壳的观察窗在检测线T和对照线C上方。

8.一种A族链球菌抗原试剂盒的制备方法，其特征在于：将权利要求7中获得的A族链球菌毒抗原检测卡装入铝箔袋，与采样吸管、说明书装盒组成A族链球菌抗原检测试剂盒，其中吸样管可选。