[发明专利]检测维生素B12的化学发光试剂盒

说明书

本发明公开了检测维生素B12的化学发光试剂盒，包括链霉亲和素磁珠混悬液、维生素B12标准品、生物素标记的维生素B12单抗、碱性磷酸酶标记的维生素B12单抗、化学发光底物、标准品稀释液、抗体稀释液、洗涤液、96孔酶标板；本发明利用磁珠的技术特点，结合生物素‑亲和素酶联免疫放大作用及碱性磷酸酶标记的酶促化学发光体系检测血清中维生素B12水平，具有非常高的灵敏度；本发明与现有技术比较更具技术和价格优势，操作简单，节省时间，易于实现全自动化操作，无需昂贵的特殊仪器，对操作人员技术水平及实验室条件要求相对较低，适于基层医院推广使用，具有较大的临床应用价值。

技术领域

本发明涉及体外诊断领域，具体涉及检测维生素B12的化学发光试剂盒。

背景技术

维生素是各种生物维持正常生理功能所必需的一类低分子有机化合物，它们大多数是生化代谢过程中的主要辅酶，在体内参与、调节、控制许多合成和分解代谢，当生物体缺乏维生素时，就会引发物质代谢障碍，引起多种疾病。维生素B12又叫钴胺素，为浅红色的针状结晶，易溶于水和乙醇，在pH值4.5～5.0弱酸条件下最稳定，强酸(pH<2)或碱性溶液中分解，遇热可有一定程度破坏，但短时间的高温消毒损失小，遇强光或紫外线易被破坏其主要生理功能是参与制造骨髓红细胞，防止恶性贫血，防止大脑神经受到破坏。维生素B12对于促进畜禽生长特别是在促进幼畜生长发育方面效果显著，在畜禽体内主要以参与一碳单位和丙酸代谢发挥作用，影响遗传物质的合成，还能维持神经功能的完整性，是畜禽不可缺少的营养原料。养殖生产过程中，常规饲料中的维生素B12一般作为安全用量，额外添加适量维生素B12可以提高畜禽生产性能，带来可观的经济效益。

目前，维生素B12的检测方法有多种，包括酶联免疫、微生物法和同位素放射免疫方法等，然而免疫检测方法和微生物方法有很多的弊端，如下：第一、免疫反应对反应条件的要求比较严苛，必须保证适宜的pH、电解质环境和排除交叉反应；第二，不同厂商检测试剂盒检测结果存在显著差异，即免疫反应的检测准确度得不到保障；第三，特异性差，不能有效区分钴胺素和类咕啉，不能给出准确的维生素B12含量；第四，放射性免疫法存在放射线辐射和污染等问题。专利号为201210273343.6，名称为“检测维生素B12的酶联免疫试剂盒及其应用”的专利采用酶联免疫法检测谷物、奶粉、原奶中的维生素B12，耗费时间长，准确度不高。

发明内容

本发明的目的在于提供检测维生素B12的化学发光试剂盒，能够定量检测人血清和血浆中的维生素B12，解决了耗费时间长，准确度不高的问题。

为实现上述目的，本发明的技术方案提供检测维生素B12的化学发光试剂盒，包括链霉亲和素磁珠混悬液、维生素B12标准品、生物素标记的维生素B12单抗、碱性磷酸酶标记的维生素B12单抗、化学发光底物、标准品稀释液、抗体稀释液、洗涤液、96孔酶标板。

上述检测维生素B12的化学发光试剂盒，其中，所述链霉亲和素磁珠混悬液为10ml，浓度为0.1mg/ml。

上述检测维生素B12的化学发光试剂盒，其中，所述维生素B12标准品为白色冻干粉，浓度为1μg/ml。

上述检测维生素B12的化学发光试剂盒，其中，所述生物素标记的维生素B12单抗为0.2ml，浓度为1mg/ml。

上述检测维生素B12的化学发光试剂盒，其中，所述碱性磷酸酶标记的维生素B12单抗为0.2ml，浓度为1mg/ml

上述检测维生素B12的化学发光试剂盒，其中，所述化学发光底物(Lumi-phos530)为100ml。

上述检测维生素B12的化学发光试剂盒，其中，所述标准品稀释液含1％牛血清白蛋白、0.02％Procline-300的磷酸盐缓冲液(0.01M，p H7.4)，容量为10ml。