[发明专利]一种丁二酸的提取方法在审

专利信息
申请号: 201910746231.X 申请日: 2019-08-13
公开(公告)号: CN110396044A 公开(公告)日: 2019-11-01
发明(设计)人: 李海;王夏燕;沈泽璇;郑文辉 申请(专利权)人: 广州怡和生物科技有限公司
主分类号: C07C51/42 分类号: C07C51/42;C07C55/10;C12P7/46
代理公司: 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 代理人: 郑自群
地址: 510000 广东省广州市高新技术开发*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 丁二酸 丁二酸发酵液 厌氧发酵 琥珀酸放线杆菌 预处理 糖类 大分子杂质 无机盐离子 吸附柱吸附 降温结晶 真空浓缩 洗脱液 小分子 一段式 色素 去除 收率 洗脱 蛋白质 过滤
【权利要求书】:

1.一种丁二酸的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将琥珀酸放线杆菌接入液体种子培养基中,在30~40℃下静置培养12~16h,其中,所述种子培养基的组成成分,按质量浓度计,包括:葡萄糖20~40g/L、玉米浆5~30g/L、蛋白胨3~10g/L、磷酸二氢钾5~10g/L、磷酸二氢钠7~15g/L、酵母提取物5~15g/L、去离子水;

(2)将经过种子培养基培养的琥珀酸放线杆菌移入发酵培养基中,经厌氧培养得到丁二酸发酵液,其中,所述发酵培养基的组成成分,按质量浓度计,包括:葡萄糖20~40g/L、玉米浆5~30g/L、酵母提取物5~15g/L、碳酸氢钠1~5g/L、氯化镁0.5~2g/L、氯化钙0.1~1g/L、碱式碳酸镁20~40g/L、去离子水;

(3)对制得的丁二酸发酵液进行预处理,除去丁二酸发酵液中的固体颗粒及大分子杂质,得到预处理液;

(4)将所得的预处理液通入一段式吸附柱中,向一段式吸附柱中通入洗脱剂进行洗脱,得到丁二酸洗脱液;

(5)将所得的丁二酸洗脱液浓缩、结晶、过滤、干燥后,得到丁二酸。

2.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述琥珀酸放线杆菌的接种量为5~15%。

3.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述厌氧培养的条件为:培养温度为35~40℃,培养时间为60~72h,搅拌速率为100~400r/min,二氧化碳通气量为0.1~0.5L/min。

4.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(3)具体包括:采用超滤膜对所得的丁二酸发酵液进行过滤,得到预处理液。

5.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(4)中,所述一段式吸附柱从上之下依次填充有:活性炭、碱性阴离子树脂,其中,所述活性炭在吸附柱的高度与碱性阴离子树脂的高度的比为0.5~2:1,所述活性炭与碱性阴离子树脂之间设置有微滤膜。

6.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述预处理液的通入流速为1~5m3/h。

7.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述洗脱剂的洗脱流速为1~5m3/h。

8.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述洗脱剂为无机酸溶液。

9.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述无机酸溶液的浓度为1~3mol/L。

10.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(5)中,所述浓缩、结晶的步骤具体包括:

将丁二酸洗脱液在70~90℃下蒸发浓缩至原体积的30~40%后,在10~100r/min的搅拌速率下,以5~20min/℃的降温速率降温至5~10℃进行结晶,保温停留0.5~1h。

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