[发明专利]一种丁二酸的提取方法在审
申请号: | 201910746231.X | 申请日: | 2019-08-13 |
公开(公告)号: | CN110396044A | 公开(公告)日: | 2019-11-01 |
发明(设计)人: | 李海;王夏燕;沈泽璇;郑文辉 | 申请(专利权)人: | 广州怡和生物科技有限公司 |
主分类号: | C07C51/42 | 分类号: | C07C51/42;C07C55/10;C12P7/46 |
代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人: | 郑自群 |
地址: | 510000 广东省广州市高新技术开发*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 丁二酸 丁二酸发酵液 厌氧发酵 琥珀酸放线杆菌 预处理 糖类 大分子杂质 无机盐离子 吸附柱吸附 降温结晶 真空浓缩 洗脱液 小分子 一段式 色素 去除 收率 洗脱 蛋白质 过滤 | ||
1.一种丁二酸的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将琥珀酸放线杆菌接入液体种子培养基中,在30~40℃下静置培养12~16h,其中,所述种子培养基的组成成分,按质量浓度计,包括:葡萄糖20~40g/L、玉米浆5~30g/L、蛋白胨3~10g/L、磷酸二氢钾5~10g/L、磷酸二氢钠7~15g/L、酵母提取物5~15g/L、去离子水;
(2)将经过种子培养基培养的琥珀酸放线杆菌移入发酵培养基中,经厌氧培养得到丁二酸发酵液,其中,所述发酵培养基的组成成分,按质量浓度计,包括:葡萄糖20~40g/L、玉米浆5~30g/L、酵母提取物5~15g/L、碳酸氢钠1~5g/L、氯化镁0.5~2g/L、氯化钙0.1~1g/L、碱式碳酸镁20~40g/L、去离子水;
(3)对制得的丁二酸发酵液进行预处理,除去丁二酸发酵液中的固体颗粒及大分子杂质,得到预处理液;
(4)将所得的预处理液通入一段式吸附柱中,向一段式吸附柱中通入洗脱剂进行洗脱,得到丁二酸洗脱液;
(5)将所得的丁二酸洗脱液浓缩、结晶、过滤、干燥后,得到丁二酸。
2.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述琥珀酸放线杆菌的接种量为5~15%。
3.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述厌氧培养的条件为:培养温度为35~40℃,培养时间为60~72h,搅拌速率为100~400r/min,二氧化碳通气量为0.1~0.5L/min。
4.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(3)具体包括:采用超滤膜对所得的丁二酸发酵液进行过滤,得到预处理液。
5.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(4)中,所述一段式吸附柱从上之下依次填充有:活性炭、碱性阴离子树脂,其中,所述活性炭在吸附柱的高度与碱性阴离子树脂的高度的比为0.5~2:1,所述活性炭与碱性阴离子树脂之间设置有微滤膜。
6.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述预处理液的通入流速为1~5m3/h。
7.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述洗脱剂的洗脱流速为1~5m3/h。
8.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述洗脱剂为无机酸溶液。
9.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述无机酸溶液的浓度为1~3mol/L。
10.根据权利要求1所述的丁二酸的提取方法,其特征在于,所述步骤(5)中,所述浓缩、结晶的步骤具体包括:
将丁二酸洗脱液在70~90℃下蒸发浓缩至原体积的30~40%后,在10~100r/min的搅拌速率下,以5~20min/℃的降温速率降温至5~10℃进行结晶,保温停留0.5~1h。
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