[发明专利]一种香椿子多糖的制备、纯化方法及其应用

说明书

本发明公开了一种香椿子多糖的制备、纯化方法及其应用，涉及香椿子多糖提取技术领域，将香椿子烘干后粉碎，热水浸提，旋蒸浓缩，醇沉，冷冻干燥后得到粗多糖，然后经聚酰胺脱蛋白、活性炭脱色，再采用DEAE‑SepharoseCL‑6B阴离子交换柱层析，分别用0、0.1、0.2、0.5mol/L NaCl溶液阶段洗脱，流收集0.2mol/L NaCl洗脱液，真空浓缩后用蒸馏水透析，然后将其冷冻干燥冻干得到均一的香椿子多糖STSP‑3；本发明制备的香椿子多糖抗凝血活性高，制备方法简单，避免了残留的化学试剂存在的安全隐患，具有良好的开发应用前景。

技术领域

本发明涉及香椿子多糖提取技术领域，特别是指一种香椿子多糖的制备、纯化方法及其应用。

背景技术

随着人们生活水平的提髙、饮食习惯的改变以及生活节奏的加快，人们对自身的健康更加的关心和重视；从天然产物中提取有效成分并加以开发利用得到了前所未有的大发展。而血栓性疾病严重影响人们的身体健康，而且近年来还有不断增加的趋势，是医学领域研究的重要课题之一，目前治疗血栓性疾病比较有效的药物是多糖类药物肝素，但是其可以导致许多不良的副作用，如导致骨质疏松、需要连续的静脉注射、导致血栓栓塞并发症、对抗凝血酶和抗凝血剂的依赖和诱发血小板减少等，而且商业肝素一般从猪和牛的肠组织中提取，且有可能被阮病毒和病毒污染。因此，从天然产物中提取类肝素物质显得尤为重要。

香椿子，又被称为椿树子，是楝科植物香椿(Toona sinensis)的果实，主要产于中国长江南北地区，具有较高的经济和药用价值。据《四川中药志》记载，其性温，味辛苦且无毒，具祛风、散寒止痛之功效，主治风寒外感、心胃气痛、风湿关节痛、疝气及冷骨风。医学研究表明，香椿子可用于治疗胃溃疡和十二指肠溃疡、慢性胃炎等。香椿子水煎剂有较强的抗血栓作用[金桂兰,陈超.香椿子水煎剂的抗血栓作用研究[J].中国药房,2011,22(15):1364-1366]香椿子水煎剂含有诸多水溶性及亲水性化学成分，如生物碱、皂苷、甾体、多糖、蛋白质、水溶性色素、植物酚类等，药效主要成分不清楚；香椿子粗多糖具有抗凝血作用[鄢文霞.香椿子多糖的抗凝血作用研究[D].三峡大学,2013]，其复合物中结合有蛋白质、色素物质，且中性多糖组份、酸性多糖组份缠绕交联，但具体是香椿子多糖中哪一种多糖产生的抗凝血作用，至今仍没有明确的研究结果。

同时申请人研究发现，现有的香椿子多糖的提取方法，制备的多是香椿子粗多糖，香椿子粗多糖是混合物，在初提的时候会产生一些杂质，如色素类、蛋白质等，在很大的程度上会对多糖的外观、纯度造成影响，且组分较为复杂，这更增加了香椿子多糖抗凝血生物性能研究的不确定性，从而限制了香椿子多糖生物活性的市场推广。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提出一种香椿子多糖的制备、纯化方法及其应用，以提高香椿子多糖的纯化均一性，从而提高香椿子多糖生物活性研究的确定性，提高其市场价值。

基于上述目的本发明提供的一种香椿子多糖，所述香椿子多糖为均一性的多糖，且包括如下摩尔百分比成分：阿拉伯糖2～7％、鼠李糖20～30％、氨基葡萄糖1.5～5.5％、半乳糖45～60％、葡萄糖2.5～10％、木糖0.25～1％、甘露糖2.5～4％。

可选的，所述香椿子多糖包括如下摩尔百分比成分：阿拉伯糖4.36％、鼠李糖26.05％、氨基葡萄糖3.74％、半乳糖54.79％、葡萄糖6.88％、木糖0.72％、甘露糖3.45％。

一种香椿子多糖的制备、纯化方法，包括如下步骤：

水提、浓缩，将香椿子烘干后进行粉碎成香椿子粉末，将香椿子粉末加入水中，搅拌混合均匀后，在温度50～90℃下提取30～150min，离心抽滤，得香椿子提取液，将香椿子提取液真空浓缩至原体积的20～35％，得香椿子浓缩液；

醇沉，向香椿子浓缩液中加入无水乙醇，搅拌混合，将混合液醇沉18～30h后，离心过滤得沉淀物，将沉淀物经过醇洗后，将沉淀加水复溶，去除酒精后，冷冻干燥得到香椿子粗多糖；