[发明专利]一种新型甲醛结合多肽及其应用在审
申请号: | 201910738175.5 | 申请日: | 2019-08-12 |
公开(公告)号: | CN110437315A | 公开(公告)日: | 2019-11-12 |
发明(设计)人: | 陈翠贤;王思捷 | 申请(专利权)人: | 福州四纪达生物医学科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/00 | 分类号: | C07K14/00;C07K17/14;G01N33/68;G01N33/58;G01N33/543;G01N21/31;C02F1/68;B01D53/72;B01D53/81;C02F101/34 |
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地址: | 350001 福建省福州市鼓楼*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甲醛 多肽 结合量 混合溶液体系 结合反应体系 末端苯丙氨酸 功能性多肽 链霉亲和素 多肽序列 环保经济 甲醛清除 结合多肽 结合能力 结合物质 结合性能 新型甲醛 最大吸收 生物素 试剂盒 吸光度 波长 包被 磁珠 悬液 修饰 制备 应用 检测 | ||
1.一种具有高效甲醛结合能力的多肽T2,其特征在于多肽T2序列如SEQ ID NO:2所示,并且多肽T2的C端最后一个氨基酸即苯丙氨酸用生物素进行修饰;多肽T2可由商业的生物公司合成,要求纯度不低于95%。
2.如权利要求1中所述的多肽T2,为了方便实际应用和循环使用,多肽T2可以经由末端苯丙氨酸上修饰连接的生物素与包被链霉亲和素的磁珠结合制备磁载多肽悬液,并加入(NH4)2SO4溶液使之成为甲醛结合反应工作液即磁载多肽工作液,其特征在于磁载多肽悬液制备的主要步骤如下:
a.采用链霉亲和素磁珠,取0.1ml链霉亲和素按照产品说明书进行磁珠的准备,用15ml的离心管装载,采用磁珠产品中自带的缓冲液,最终得到10ml工作液状态下的磁珠液;
b.往a.中的磁珠液中加入10mmol/L的多肽T2溶液0.1ml,在室温下保持充分混匀15min;
c.借助磁铁并用磁珠产品中自带的缓冲液洗涤已包被多肽的磁珠3次,去除未结合物质,之后加入10ml纯净水,即得到磁载多肽悬液,可置于-20度环境中长期保存待用;需要进行甲醛结合时再向反应体系中加入(NH4)2SO4溶液。
3.根据权利要求2中所述的磁载多肽,其特征在于所述磁载多肽具备特殊的甲醛结合性能:每1μmol磁载多肽T2其甲醛结合量可以达到84.69mg,磁载多肽和甲醛的结合反应体系中必须加入终浓度为0.1-0.3mol/L的(NH4)2SO4溶液,而体系中最佳的(NH4)2SO4浓度为0.182mol/L;磁载多肽T2与甲醛的结合均可以被NaOH和NaCl的混合溶液体系所破坏,其中NaOH的终浓度为0.05-0.15mol/L,NaCl的终浓度为0.1-0.3mol/L,并且NaOH和NaCl的浓度配比为1:2,而体系中最佳的NaOH和NaCl终浓度分别为0.075mol/L和0.15mol/L;磁载多肽T2与甲醛结合后在482nm处有最大吸收,并且吸光度与甲醛结合量成正比,其甲醛结合量y和482nm波长下的吸光度x之间的关系为y=45.763x-0.7826。
4.如权利要求2或3中所述的磁载多肽在甲醛清除、检测方法和试剂盒中的应用。
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