[发明专利]高效液相色谱法定量检测氟尿嘧啶注射液中尿素的含量

说明书

本发明涉及分析化学领域，具体公开了一种氟尿嘧啶注射液中尿素的定量检测方法。本发明所述的检测方法是：用十八烷基键合硅胶为填充剂，填料粒径5μm；流动相为0.12％己烷磺酸钠的水溶液与甲醇的体积比为95:5的混合液，等度洗脱，流速0.8ml/min；检测波长195nm。本发明的方法，专属性、准确性良好，能够定量的检测出氟尿嘧啶注射液中尿素的含量而不受其他工艺杂质的影响。

技术领域

本发明属于分析技术领域，涉及一种注射液中有关物质的测定，特别涉及氟尿嘧啶注射液中尿素的定量测定。

背景技术

药品是一类特殊商品，是用来诊断、预防及治疗疾病的一类特殊物质，与人们的健康和生命安危有极其密切的关系，其质量控制极为重要。药物安全性评价的一个重要内容是药物中有关物质的质量分数控制。

在药物分析中所称的“有关物质”是指药物中的有机杂质，主要来源于药物活性成分的制备过程，如起始原料、试剂、中间体、副产物和异构体等物质，也可能是制剂在生产、贮藏和运输过程中产生的降解产物、聚合物或晶型转变过程等特征杂质。通过对这些有关物质的测定，可以设法改变其合成路线、实验条件、储藏运输条件等因素，避免产生有关物质或使其降到最低限度。

药品在临床使用过程中产生的不良反应除了与主成分的药理活性有关，与杂质的影响也密不可分。为保证临床安全用药，必须严格控制药品中的杂质。

氟尿嘧啶注射液，对多种肿瘤具有较好的抗肿瘤效果，主要用于治疗消化道肿瘤，或较大剂量氟尿嘧啶治疗绒毛膜上皮癌。亦常用于治疗乳腺癌、卵巢癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌及皮肤癌等。目前氟尿嘧啶注射液中的主要有关物质为：嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)三酮(杂质A)、二氢嘧啶-2,4,5(3H)-三酮(杂质B)、尿嘧啶(杂质C)、5-甲氧基尿嘧啶(杂质D)、5-氯尿嘧啶(杂质E)、2-乙氧基-5氟尿嘧啶(杂质F)、尿素(杂质G)。经检索，目前尚无对氟尿嘧啶注射液中的尿素检测采用高效液相色谱的方法，其原因在于尿素属于降解杂质，不易被发现，经详尽的文献检索发现，目前检测氟尿嘧啶注射液中尿素的方法只有药典BP2019方法如下表1所示。

表1薄层色谱方检测氟尿嘧啶中的尿素

上述方法只是用薄层法进行限度控制，检测能力有限，只能粗略的检测产品中的尿素，而不能对产品中的尿素进行定量检测，对产品的质量控制有待进一步提高。因此急需寻找一种能够定量检测氟尿嘧啶注射液中尿素含量的方法。

发明内容

本发明提供一种氟尿嘧啶注射液中尿素的定量分析检测方法，包括如下步骤：采用反相高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，采用紫外检测器，流动相为含有己烷磺酸钠的水溶液与甲醇的混合液等度洗脱。

进一步地，色谱柱规格为4.6*250mm，填料粒径5μm，优选品牌和型号为 YMC ODS-AQ柱；

进一步地，检测波长为190nm～210nm，优选为195nm；

进一步地，流速为0.6～0.9ml/min，优选为0.8ml/min；

进一步地，进样量为15～25μl，优选为20μl；

进一步地，己烷磺酸钠的水溶液的质量分数为0.10～0.15％，优选的，流动己烷磺酸钠水溶液的质量分数为0.12％，更优选的，流动相为质量分数为0.12％己烷磺酸钠的水溶液与甲醇的混合液的体积比为95:5。

进一步地，流动相的配制方法为：先配制己烷磺酸钠的水溶液，而后再与甲醇混合成体积比为95:5的混合溶液。

优选地，0.12％的己烷磺酸钠的水溶液的配制方法为：称取己烷磺酸钠1.2g 加水1000ml，溶解，摇匀，过滤。