[发明专利]一种酶促反应体系用于潜在指纹显现的方法

说明书

本发明涉及痕量检测技术领域，具体公开了一种酶促反应体系用于潜在指纹显现的方法，该方法为一种酶催化反应产生荧光产物而显现出潜在指纹的方法。先制备酶促反应体系显色液，然后将其喷或涂到可能有指纹但不含荧光物质的指纹客体上，体系中的酶等物质会与指纹中的乳酸发生反应，产生有荧光的产物从而显现指纹，在紫外光照射下可直接拍照，本发明的优点在于灵敏、快速，显色试剂组成不复杂，对操作人员不会产生毒性，还可以实现“隐蔽侦察”，有望在刑侦等方面得到应用。

技术领域

本发明涉及痕量检测技术领域，具体涉及一种酶促反应体系用于潜在指纹显现的方法。

背景技术

指纹具有人各不同,终生不变和触物留痕的特点。科学正确地发现、提取、显现、鉴定指纹对于开展侦查工作、惩治犯罪具有重要的实践作用，对遗留在客体表面上的指纹进行提取和鉴定是侦破案件的重要依据。

目前识别潜在指纹的方法可分为三大类：物理显现法、物理化学显现法和化学显现法，当前技术的发展和改进主要集中在采用新颖的表征手段来增加检验的灵敏度以及不同的适用范围，中国专利(CN201410146802.3)中，王利华等采用了多种荧光猝灭体系进行潜在指纹显现。在中国专利(CN201810189499.3)中，发明人制备了一种磁性荧光粉末进行潜指纹显现，提高灵敏度，但是其制备过程复杂。中国专利(CN201710888373.0)制备了一种特殊材料：黑体辐射发光材料，通过该材料来降低背景荧光获得较清晰的指纹图像，但是该材料的制备过程复杂。

酶作为生物催化剂，其催化反应效率高，专一性强，灵敏度高。中国专利(CN201710045379.1)利用酶对潜指纹进行了显现，但其需要对潜指纹样本进行两次转移，再用抗体进行标记后，才用相关试剂进行显现，整个操作过程非常复杂，且耗时长。

目前尚未见在常温常压下，短时间内通过酶催化潜在指纹中痕量物质发生反应显现潜指纹的报道。

发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种酶促反应体系用于潜在指纹显现的方法。汗液是潜指纹的主要成分，指纹汗液中除了大部分的水分以外，还含有乳酸、氨基酸、蛋白质、氯化钠等物质，文献资料显示汗液中乳酸含量约为6.6×10^-3mol/L。乳酸脱氢酶可以催化乳酸发生反应生成丙酮酸，该反应的乳酸检出限为2.25×10^-5mol/L；由于酶促反应具有专一性，潜指纹中其他共存组分对该反应不会产生干扰，因此使用该方法可以直接对潜指纹中的乳酸进行测定。利用该酶促反应可以建立一种成本低、快速、灵敏度高、操作简单的潜指纹显现方法。该方法能快速显现汗潜指纹且显现试剂的组成不复杂，显现操作简单，对操作人员不会产生毒性。

为了实现上述技术目的，本发明的一种酶促反应体系用于潜在指纹显现的方法的步骤如下：

(1)制备好酶促反应体系显色液，置于冰箱备用；

(2)将酶促反应体系显色液喷或涂到可能有指纹但不含荧光物质的指纹客体上；

(3)在紫外光照下显影。

所述酶促反应体系显色液包括：50～80U/mL乳酸脱氢酶、0.007～0.009mol/L氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和Tris-HCl-水合肼缓冲液三种液体。

所述Tris-HCl-水合肼缓冲液的制备方法：参照常规的生物化学实验书中的附录配置pH9.0、0.05mol/LTris-HCl缓冲液后，再向其中加入水合肼使水合肼终浓度为1.2～1.8mol/L(优选1.5mol/L)；

所述水合肼以水合肼浓度为50％(质量百分比)以上的水合肼溶液形式加入。

所述酶促反应体系显色液喷或涂到指纹客体上的顺序为：先喷或涂Tris-HCl-水合肼缓冲液和氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，最后喷或涂乳酸脱氢酶，其中Tris-HCl-水合肼缓冲液和氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸先后顺序不限，也可以同时喷或涂。