[发明专利]mRNA疫苗及其试剂盒、应用

说明书

本发明涉及mRNA疫苗及其试剂盒、应用，mRNA疫苗由隔开的Kras的表位抗原基因序列，和Survivin的表位抗原基因序列，和CEA的表位抗原序列制备得到，试剂盒中包括本发明的mRNA疫苗，和PD‑1抗体。本发明的抗体可以用于制备诸如直肠癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、纤维肉瘤、肾癌、白血病、肺癌、白淋巴瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、骨髓瘤、神经母细胞瘤、浆细胞瘤和前列腺癌的药物。本发明首次把KRas、Survivin和CEA这3个“不可成药”靶点的表位抗原联合在一起制备出mRNA疫苗，达到抑制肿瘤生长的目的。

技术领域

本发明涉及mRNA疫苗及其试剂盒、应用。

背景技术

癌症治疗领域尝试许多方法，如肿瘤切除，但切掉之后很快就复发；放化疗法可以把长得快的癌症细胞杀死，但肿瘤也会重新长出来；小分子靶向药物和大分子靶向药物治疗癌症，发生耐药性问题；CAR-T作为一种新的治疗癌症手段，主要在治疗血癌患者中有效；PD-1和PD-L1抗体药物的出现代表免疫治疗的开始，但也只有不到30％的癌症病人能从中受益。因此治疗型mRNA疫苗是一种新型免疫治疗疗法，能够有效抑制肿瘤生长。具体来说mRNA通过纳米脂质颗粒运送到细胞质，运用人体本身的蛋白翻译系统产生抗原，加工成为表位抗原多肽(Epitopes)，这些多肽和MHC Class I或者MHC Class II分子结合，转运到细胞表面，MHC Class I结合的表位抗原与CD8+T细胞相互作用，诱导T细胞细胞毒性应答反应；MHC Class II结合的epitopes与CD4+T细胞相互作用，引发抗原专一的抗体反应，从而达到抑制肿瘤生长的目的。

mRNA疫苗在安全性，快速制备和免疫原性方面具有颠覆性的优势。mRNA疫苗不存在减毒疫苗潜在的逆转危险；不存在灭活疫苗的恢复突变问题；不存在DNA疫苗被整合到宿主基因组中并导致基因突变的可能。并且通常生产一种传统流感疫苗需要至少5-6个月的时间，而mRNA疫苗可以实现标准化生产，在10天内生产出所需疫苗。免疫原性方面，mRNA疫苗能够诱导B细胞和T细胞免疫应答，能引起免疫记忆效果，可以传递更多有效抗原，可以一次表达多个抗原，这是传统疫苗所无法比拟的。

KRas、Survivin和CEA这三个基因属于肿瘤相关抗原(Tumor associatedantigens，TAAs)，它们本质上是非突变的自身抗原，存在于正常基因组中。TAAs通常在人体正常细胞中以相对低水平表达的状态存在，而在癌症组织中表现为过度表达。接种以TAAs为靶点的癌症疫苗之后可以激发机体产生针对相应TAAs的免疫反应，主要是通过激活T细胞，达到杀灭和清除表达该TAAs抗原的癌细胞的目的。

虽然KRas、Survivin和CEA是已知的癌症基因靶点，但是迄今为止还没有针对这三个癌症基因靶点的小分子或者大分子药物成功批准上市，它们是著名的“不可成药”靶点。很多生物制药公司尝试开发针对KRas的靶向药物，但Kras乃是最难成药靶点之一，所以多年来没有进展。很多现在小分子药物研发的前沿新技术都是以征服Kras为目的，如诱导蛋白降解的PROTAC技术、小分子RNA抑制剂、化学诱导二聚的SMART平台等，但这些技术自身都有很多细节需要时间搞清楚。目前有针对KRas和Survivin这两个靶点的多肽疫苗，但目前还没有成功的利用这些多肽疫苗在临床实验上成功的报道。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种mRNA疫苗及其试剂盒、应用。

本发明的mRNA疫苗，由隔开的：

Kras的表位抗原基因序列，和

Survivin的表位抗原基因序列，和

CEA的表位抗原序列

制备得到，