[发明专利]一种特立帕肽的纯化方法

权利要求书

1.一种特立帕肽的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)以纯化水溶解特立帕肽粗品，控制特立帕肽粗品浓度为50-100mg/mL，用0.45μm滤膜过滤；

2)将特立帕肽粗品溶液以UniPS40-300填料为固定相的色谱柱进行梯度洗脱，以0.1-0.5％TFA水溶液为流动相A，以70-90％乙腈水溶液为流动相B；

3)将2)得到的纯度大于95%的馏分以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱进行梯度洗脱，以20-100mmol/L硫酸盐缓冲溶液为流动相A，调节pH为2-5；以70-90％乙腈水溶液为流动相B；

4)将3)得到的纯度大于98.5%的馏分用于转盐，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定的色谱柱，先以20-200mmol/L醋酸铵和乙腈，按一定的比例进行离子交换；再以0 .01-0.1％醋酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；

5)将转盐后纯度大于99.8%，单杂小于0.1%的馏分，浓缩后冻干。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述步骤2)中TFA水溶液浓度为0.1-0.2％，乙腈水溶液为75-85％。

3.根据权利要求1或2任一项所述方法，其特征在于：所述步骤2)中TFA水溶液浓度为0.1％，乙腈水溶液为80％，梯度为乙腈％：32-38％。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述十八烷基硅烷键合硅胶填料为DaisoC18。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述步骤3)中硫酸盐缓冲溶液浓度为20-50mmol/L，乙腈水溶液为70-80％。

6.根据权利要求1或5任一项所述方法，其特征在于：所述步骤3) 中硫酸盐浓度为50mmol/L，乙腈水溶液为80％，梯度为乙腈％：32-42％。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述步骤3)中硫酸盐为硫酸钠。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述步骤3)中硫酸盐缓冲溶液pH为2-3。

9.根据权利要求1或8任一项所述方法，其特征在于：所述步骤3)中硫酸盐缓冲溶液pH为2.3。

10.根据权利要求1、8任一项所述方法，其特征在于：所述步骤3)中用磷酸调节硫酸盐缓冲溶液pH。

11.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述步骤4)中醋酸铵浓度为20-50mmol/L。

12.根据权利要求1或11任一项所述方法，其特征在于：所述步骤4)中醋酸铵浓度为50mmol/L。

13.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述步骤4)中离子交换的比例为：醋酸铵：乙腈＝95:5。

14.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述步骤4)中醋酸水浓度为0.05％，梯度为乙腈％：20-30％。