[发明专利]中间锦鸡儿诱导型启动子CiNAC071及其应用

说明书

本发明涉及生物基因工程领域，具体而言，涉及诱导型启动子CiNAC071及其应用，CiNAC071启动子受ABA和GA诱导，在ABA处理下抑制启动子活性，在GA处理下促进启动子活性，可用于转基因表达载体的构建。利用诱导型启动子更有利于基因功能的研究。

技术领域

本发明涉及一种诱导型启动子CiNAC071及其应用，具体而言，涉及CiNAC071启动子在ABA处理下和GA处理下启动子的活性诱导。CiNAC071启动子受ABA和GA诱导，可用于转基因表达载体的构建。利用诱导型启动子更有利于基因功能的研究。

背景技术

植物生长发育是不同基因在时间、空间上有序表达和协同作用的过程。基因在整个生长过程中的开关、表达模式以及表达丰度等均受到精确调控。植物基因的表达调控可以分为转录前、转录、转录后、翻译、翻译后等5个不同水平，其中转录水平上的调控是最主要和最为关键的环节。基因在转录水平上的调控主要是通过调控转录调节因子与启动子的结合与否、强弱变化等来实现。一般的转基因植物都是通过T-DNA插入植物基因组的方式获得的，如果转入基因与植物生长发育密切相关，就会引起转基因植物生长发育发生变化，以至于难以获得转基因纯合体种子，无法进行表型分析。因此，就需要诱导型启动子，在转基因植物的筛选中，该基因不表达，当研究基因功能时，通过诱导物诱导该基因表达。同时，也存在外源基因在转基因植物中表达量太低，不利于基因功能研究的情况，利用诱导型启动子更有利于基因功能的研究。因此，诱导型启动子在基因工程中有重要意义。

NAC转录因子是植物特有的、最大的转录因子家族之一。NAC转录因子家族由最初在牵牛花中发现的NAM(No apical meristem)、拟南芥的ATAF(Arabidopsistranscription activation factor)和CUC(cup-shaped cotyledon)构成。该家族蛋白的N末端具有高度保守的结构域，由150个左右氨基酸序列构成，作为DNA结合结构域；C末端相对可变，作为转录调控区域，可以激活或者抑制转录；部分NAC转录因子含跨膜结构域。NAC转录因子的DNA结合结构域由A-E五个亚结构域构成，其中亚结构A可能参与二聚体的形成，亚结构域C和D带正电参与DNA的结合，而亚结构域B和D决定NAC转录因子的多样性。在NAC转录因子的上游启动子序列，含有许多调控植物代谢、生长发育和胁迫应答调控的顺式元件，但其调控机理还不是完全明确。近年来，在许多物种中均发现NAC转录因子家族基因的存在，例如拟南芥(Arabidopsis thaliana)中有117个NAC基因，水稻(Oryza sativa)中有151个NAC基因，大豆(Glycine max)中有152个NAC基因，苜蓿(Medicago truncatula)中有97个NAC基因。