[发明专利]一种基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法及应用

权利要求书

1.一种基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，所述方法包括使用液相色谱串联质谱检测内源性化合物时，使用目标分析物所对应的同位素内标进行基质效应评价。

2.如权利要求1所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，方法具体包括：

纯溶剂同位素内标溶液的配制：将同位素内标添加到纯溶剂中；

基质匹配同位素内标溶液的配制：将同位素内标添加到经前处理后的样品基质中；

测定：将上述两种溶液注入液相色谱串联质谱系统进行分析，得到两种溶液的峰面积；

采用计算公式MEIS＝(A-B)/A×100进行计算，其中MEIS为同位素内标基质效应，A为纯溶剂中同位素内标的响应峰面积，B为基质匹配同位素内标溶液的响应峰面积。

3.如权利要求2所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，所述方法还包括，MEIS的判定：具体的，-20％≤MEIS≤20％，基质效应可忽略；MEIS＞20％，基质效应抑制严重；MEIS＜-20％，基质效应增强严重。

4.一种基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，所述方法包括使用液相色谱串联质谱检测乳粉内源性化合物胆碱和左旋肉碱时，使用同位素内标胆碱-d4和左旋肉碱-d3进行基质效应评价，具体的，方法包括：

纯溶剂同位素内标溶液的配制：将同位素内标添加到纯溶剂中；

基质匹配同位素内标溶液的配制：将同位素内标添加到经前处理后的样品基质中；

测定：将上述两种溶液注入液相色谱串联质谱系统进行分析，得到两种溶液的峰面积；

计算公式：MEIS＝(A-B)/A×100，其中MEIS为同位素内标基质效应，A为纯溶剂中同位素内标的响应峰面积，B为基质匹配同位素内标溶液的响应峰面积；

MEIS判定：-20％≤MEIS≤20％，基质效应可忽略；MEIS＞20％，基质效应抑制严重；MEIS＜-20％，基质效应增强严重。

5.如权利要求4所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，所述乳粉包括但不限于牛奶粉、全脂奶粉、脱脂奶粉和和羊奶粉。

6.如权利要求4所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，质谱参数条件：正离子电喷雾模式下的SRM模式，离子传输管温度：350℃，鞘气：45arb，辅助气：10arb，毛细管电压5500℃，CID气体：1.5mtorr。

7.如权利要求4所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，色谱参数：色谱柱为Click XIon或HILIC色谱柱(优选为Click XIon色谱柱)；柱温35℃；进样体积：0.35μL；流速0.35mL/min；洗脱方式：梯度洗脱；

所述梯度洗脱程序如下：

0～1.0min，流动相A95％→95％，流动相B5％→5％；

1.0～2.0min，流动相A95％→85％，流动相B5％→15％；

2.0～6.0min，流动相A85％→40％，流动相B15％→60％；

6.0～8.0min，流动相A40％→40％，流动相B60％→60％；

8.0～9.5min，流动相A40％→95％，流动相B60％→5％；

9.5～12min，流动相A95％→95％，流动相B5％→5％；

其中，以乙腈作为流动相A，以0.1％甲酸水溶液(含10mM醋酸铵)作为流动相B。

8.权利要求1-7任一项所述方法在评价内源性化合物基质效应中的应用；优选的，所述应用包括但不限于评价样品前处理方式或色谱柱对内源性化合物基质效应影响。

9.如权利要求8所述应用，其特征在于，所述样品为乳粉，所述乳粉优选包括但不限于牛奶粉、全脂奶粉、脱脂奶粉和羊奶粉；

优选的，所述样品前处理方式包括但不限于对样品进行水浴水解或微波辅助水解。

10.如权利要求8所述应用，其特征在于，所述色谱柱包括但不限于Click XIon柱，T3柱和Hilic柱；优选为Click XIon柱。