[发明专利]一种K252A发酵培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种制备K252A的发酵培养基，其特征在于，所述发酵培养基由以下重量百分含量的组分组成：

甘油 0.2~0.5%

麦芽糖 0.5~1%

麦芽糊精 5~9%

可溶性淀粉 3~4%

油酸甲酯 0~3%

黄豆饼粉 0.2~0.6%

玉米粉 1~1.5%

棉籽饼粉 1~1.5%

酵母抽提物 2~3%

玉米浆干粉 0.5~1%

硝酸铵 0.1~0.5%

硫酸镁 0.5~0.8%

磷酸氢二钾 0.01~0.02%

碳酸钙 0.1~0.3%

氯化胆碱 0.01~0.05 %

丁二酸二钠 0.08~0.4%

蛋氨酸 0.26~1.3%

余量为水，

所述发酵培养基消毒前pH值为6.4~8.0。

2.根据权利要求1所述的发酵培养基制备K252A的方法，其特征在于：其包括，

摇瓶发酵方法：将摇瓶种子培养液按照5~15%的体积比接种至权利要求1中所述的发酵培养基中，在26~32℃、150~500rpm条件下培养，培养周期200~240h，得到含有K252A的发酵液；或者

罐发酵方法：将罐种子培养液按照发酵培养基体积5~10%的比例接种至权利要求1中所述的发酵培养基中，在26~32℃条件下培养，通过搅拌与通气联动控制，使溶氧始终维持在15~30%；接种24h后开始至培养结束，用氨水调节pH使其控制在6.8±0.2；接种36h后开始，期间流加葡萄糖溶液和功能因子混合液，至培养结束前1天停止流加，培养周期220~264h，得到含有K252A的发酵液；其中，

所述摇瓶种子培养液通过下述步骤获得：将Nocardiopsis sp.K-252，NRRL 15532接种至种子培养基中，在26~32℃，150~330rpm条件下培养24~72h，获得摇瓶种子培养液；

所述罐种子培养液通过下述步骤获得：将上述摇瓶种子培养液，先接种到种子罐中的种子培养基中，在26~32℃、50~300rpm条件下扩大培养18~96h，获得罐种子培养液。

3.根据权利要求2所述的制备K252A的方法，其特征在于：所述罐发酵方法中流加葡萄糖溶液的控制策略是维持发酵液中葡萄糖浓度在1~5g/L范围内，所述流加的葡萄糖溶液的浓度为500g/L。

4.根据权利要求2所述的制备K252A的方法，其特征在于：所述罐发酵方法中流加的功能因子混合液成分为：氯化胆碱5g/L、丁二酸二钠 40g/L、蛋氨酸130g/L，余量为水；所述流加功能因子混合液的速度控制在每小时流加体积为初始发酵培养基体积的0.05~0.1%。

5.根据权利要求2所述的制备K252A的方法，其特征在于：所述的种子培养基由以下重量百分含量的组分组成：

甘油 0.5%

玉米淀粉 3%

黄豆饼粉 2%

酵母抽提物 0.5%

玉米浆干粉 0.5%

碳酸钙 0.3%

余量为水；

所述种子培养基消毒前pH值为6.5~7.5。