[发明专利]对槲皮素具有糖基化的蔗糖磷酸化酶突变体Q345F

说明书

本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶的突变体Q345F，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的蔗糖磷酸化酶突变体Q345F是由编码Bspase的第345位氨基酸由谷氨酰胺突变为苯丙氨酸得到的，通过引入共轭π‑π键获得了对槲皮素具有转糖苷活性，突变体Q345F具有用时短且转化效率高的良好特性。

技术领域

本发明涉及酶分子改造技术领域，特别涉及一种对槲皮素具有糖基化的蔗糖磷酸化酶突变体Q345F。

背景技术

蔗糖磷酸化酶(Sucrose phosphorylase，EC 2.4.1.7)属于糖基水解酶13家族，具有较为优良和独特的转糖苷催化性质，可以提高产物热稳定性、水溶性、光敏感性及改善药代动力学特性等(Aerts D.,Verhaeghe T.F.,Roman B.I.,et al.Transglucosylationpotential of six sucrose phosphorylases toward different classes ofacceptors.2011，Carbohydr Res，346(13):1860-1867.)，进而可以更高效的利用在食品及医药等领域。

黄酮类化合物存在于大多数的植物中，具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎和抗病毒活性(Chan-Woo L,Yongjoo N,Nok-Hyun P,et al.Amentoflavone inhibits UVB-inducedmatrix metalloproteinase-1expression through the modulation of AP-1componentsin normal human fibroblasts[J].Applied BiochemistryBiotechnology,2012,166(5):1137-1147.)，并且具有一定的杀虫和抑制心脑血管疾病等作用(Arjun T,Eun-RhanW,Chi E Y,et al.Biflavonoids are superior to monoflavonoids in inhibitingamyloid-βtoxicity and fibrillogenesis via accumulation of nontoxic oligomer-like structures[J].Biochemistry,2011,50(13):2445.)。尽管其药理作用显著，但其较低的水溶解性限制了在医疗方向的进一步应用。槲皮素(quercetin)是一类重要的黄酮类化合物，具有黄酮类普遍具有的高效生物利用价值，尤其是抗肿瘤和抗癌活性。然而从结构上看，槲皮素具有分子堆砌较紧密的平面结构，因此水溶性和脂溶性都较差，这就极大地限制了它在临床治疗上的应用。为了改善槲皮素的物理化学性质并提高其生物活性，人们对其进行了结构改造来增强其水溶性或脂溶性并改善其生物利用度，以期开发出活性更高、更具有临床应用价值的药物。