[发明专利]香菇菌种以及利用其简易制备香菇菌丝体的方法在审
| 申请号: | 201910696401.8 | 申请日: | 2019-07-30 |
| 公开(公告)号: | CN110283731A | 公开(公告)日: | 2019-09-27 |
| 发明(设计)人: | 陈文杰;张瑞青;韩韬;章淑艳;古述江;马清河;秦艳梅 | 申请(专利权)人: | 河北省微生物研究所 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A01H15/00;A01G18/40;C12R1/645 |
| 代理公司: | 石家庄海天知识产权代理有限公司 13101 | 代理人: | 田文其 |
| 地址: | 071051 河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 香菇菌丝体 制备 香菇菌种 简易 深层通气发酵 发酵法生产 发酵培养基 菌丝培养液 培养液接种 微生物发酵 工艺步骤 工艺稳定 技术难度 设备投入 深层发酵 深层培养 发酵液 组培瓶 灭菌 产率 生产成本 接种 香菇 | ||
1.一株香菇菌种,分类命名为香菇Lentinus edodes,保藏编号为CGMCC NO.16991。
2.利用权利要求1的菌种简易制备香菇菌丝体的方法,其特征在于包括如下工艺步骤:
A、深层通气发酵:按照接种量为3%-10%的体积比将菌种接种于发酵罐内灭菌后的发酵培养基,在通气率为0.5-0.7:1、发酵温度为23℃-30℃的条件下发酵不低于5天,测定菌丝体湿重不低于18g/L结束发酵得到深层培养发酵液;菌种采用香菇Lentinus edodesCGMCC NO.16991,发酵培养基采用不加琼脂的PDA培养基,按照每1000ml不加琼脂的PDA培养基10mg-30mg的添加量在其中加入维生素B1;
B、组培瓶静止发酵:将产菌丝体培养基置于组培瓶中,灭菌后接种步骤A中的深层培养发酵液,在温度为23℃-30℃的条件下培养20-30天,当检测胞外多糖不低于14.0g/L时结束发酵得到香菇菌丝体,产菌丝培养基由如下原料组成:
马铃薯淀粉5g-15g;麦芽糖1g-8g;葡萄糖20g-30g;蛋白胨0.2g-1.5g;水1000ml;pH值=5.0-7.0。
3.根据权利要求2所述的简易制备香菇菌丝体的方法,其特征在于所述的步骤B中组培瓶内产菌丝培养基的装量为40ml-150ml,接种量为每个装有产菌丝培养基的组培瓶中接入步骤A的深层培养发酵液3ml-8ml。
4.根据权利要求3所述的快速制备香菇菌丝体的方法,其特征在于所述的步骤B中组培瓶容积为650ml。
5.根据权利要求2所述的快速制备香菇菌丝体的方法,其特征在于所述的步骤B中的培养是在避光状态下进行的暗培养。
6.根据权利要求2所述的快速制备香菇菌丝体的方法,其特征在于所述的步骤B中胞外多糖的测定采用苯酚—硫酸法。
7.根据权利要求2-6中任一项所述的快速制备香菇菌丝体的方法,其特征在于还包括一步骤C,该步骤的工艺条件如下:
C、将步骤B中培养好的香菇菌丝体取出,洗净菌丝体表面的异物后干制封存。
8.根据权利要求2-6中任一项所述的快速制备香菇菌丝体的方法,其特征在于是将香菇Lentinus edodes CGMCC NO.16991经过扩大培养后,按照种子液:培养液的体积比为3%-10%的接种量将种子液接种于灭菌后的发酵培养基。
9.根据权利要求8所述的快速制备香菇菌丝体的方法,其特征在于所述的扩大培养及接种过程包括:
(1)将香菇Lentinus edodes CGMCC NO.16991斜面菌种经扩大培养后制成种子液;
(2)将制成的种子液按种子液:培养液的体积比为3%-10%的接种量接种于灭菌后的发酵培养基,进行通气发酵;
所述的斜面菌种培养基由如下原料组成:
去皮马铃薯150g-500g煮10-30min取汁、葡萄糖10g-40g、琼脂15g-25g、水1000ml,pH值自然。
10.根据权利要求9所述的快速制备香菇菌丝体的方法,其特征在于用于扩大培养制备种子液的种子培养基选用不加琼脂的PDA培养基,种子液的培养条件是:
按照每瓶接入100ml-300ml的装量将种子培养基置于500ml三角瓶中灭菌,按照每个三角瓶接种3-5瓶的数量将斜面菌种接入灭菌后的种子培养基,在温度为25℃、转速为180转/分钟的条件下振荡培养7-10天,得到种子液。
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