[发明专利]具有改善特性的酰基-ACP还原酶

权利要求书

1.一种重组宿主细胞，其外源表达酰基-CoA还原酶(E.C.1.2.1.50)活性、酰基-CoA合酶(E.C.2.3.1.86)活性和硫酯酶(E.C.3.1.2.*或E.C.3.1.2.14或E.C.3.1.1.5)活性，其中，与不外源表达所述所述酰基-CoA还原酶、酰基-CoA合酶和硫酯酶活性的重组宿主细胞产生的醇的量相比，所述酰基-CoA还原酶、酰基-CoA合酶和硫酯酶活性的外源表达增加了所述重组宿主细胞产生的醇的量。

2.一种细胞培养物，其包含外源表达酰基-CoA还原酶(E.C.1.2.1.50)活性、酰基-CoA合酶(E.C.2.3.1.86)活性和硫酯酶(E.C.3.1.2.*或E.C.3.1.2.14或E.C.3.1.1.5)活性的重组宿主细胞，其中，与不外源表达所述所述酰基-CoA还原酶、酰基-CoA合酶和硫酯酶活性的重组宿主细胞产生的醇的量相比，所述酰基-CoA还原酶、酰基-CoA合酶和硫酯酶活性的外源表达增加了所述重组宿主细胞产生的醇的量。

3.一种产生脂肪醇的方法，所述方法包括：培养外源表达酰基-CoA还原酶(E.C.1.2.1.50)活性、酰基-CoA合酶(E.C.2.3.1.86)活性和硫酯酶(E.C.3.1.2.*或E.C.3.1.2.14或E.C.3.1.1.5)活性的重组宿主细胞，其中，与不外源表达所述所述酰基-CoA还原酶、酰基-CoA合酶和硫酯酶活性的重组宿主细胞产生的脂肪醇组合物的滴度相比，在所述重组宿主细胞中所述酰基-CoA还原酶、酰基-CoA合酶和硫酯酶活性的外源表达导致脂肪醇组合物具有更高滴度的脂肪醇。

4.一种重组宿主细胞，其表达外源酰基-ACP还原酶(AAR)多肽和外源酰基载体蛋白质(ACP)多肽，其中，与仅表达外源AAR多肽的重组宿主细胞相比，在所述重组宿主细胞中表达所述外源酰基载体蛋白质(ACP)多肽增加了脂肪醇产量。

5.根据权利要求4所述的重组宿主细胞，其中所述外源ACP多肽选自SEQ ID NO:4和SEQID NO:8。

6.根据权利要求4所述的重组宿主细胞，其中所述重组宿主细胞进一步包含外源磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶多肽。

7.根据权利要求6所述的重组宿主细胞，其中所述磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶多肽是来自枯草芽孢杆菌的sfp多肽。

8.根据权利要求7所述的重组宿主细胞，其中来自枯草芽孢杆菌的sfp多肽由具有根据SEQ ID NO:11的核苷酸序列的核酸编码。

9.根据权利要求6所述的重组宿主细胞，其中所述外源ACP多肽选自SEQ ID NO:2和SEQID NO:10。

10.根据权利要求4所述的重组宿主细胞，其中所述外源AAR多肽是变体AAR多肽，其与SEQ ID NO:65的氨基酸序列具有至少90％序列同一性，其中所述变体AAR多肽在位置61处具有突变，并且其中所述位置61处的突变是取代突变D61E。

11.根据权利要求4所述的重组宿主细胞，其中所述外源AAR多肽是变体AAR多肽，其与SEQ ID NO:34的氨基酸序列具有至少90％序列同一性，其中所述变体AAR多肽包含选自以下组的突变：Q40V、G52V、G273E、K303G、H340P、L344A、L344D、L344S、L344T、A345R、V346P、V346G。

12.一种细胞培养物，其包含其表达外源酰基-ACP还原酶(AAR)多肽和外源酰基载体蛋白质(ACP)多肽的重组宿主细胞，其中，与仅表达外源AAR多肽的重组宿主细胞相比，在所述重组宿主细胞中表达所述外源酰基载体蛋白质(ACP)多肽增加了脂肪醇产量。