[发明专利]一种从植物中分离熊果酸和齐墩果酸的方法

说明书

一种从植物中分离熊果酸和齐墩果酸的方法，所述方法为：在分液漏斗中加入正己烷、二氯甲烷、甲醇和水组成的混合溶剂体系，充分振摇后静置分层，取上相加入酸性物质作为固定相，下相加入碱性物质作为流动相；取植物的粗提物用固定相和未碱化的下相的混合溶液溶解，得到样品溶液；取固定相注满逆流色谱仪的分离柱，随后注入样品溶液，待进样完成后，开启速度控制器，使分离柱正转，持续注入流动相，紫外检测器检测，用自动部分收集器收集洗脱液，合并含目标物质的洗脱液，减压蒸除溶剂并干燥，得到目标产物；本发明通过pH区带精制逆流色谱分离熊果酸和齐墩果酸，工艺简单，回收率高。

(一)技术领域

本发明涉及一种从植物中分离熊果酸和齐墩果酸的方法。

(二)背景技术

熊果酸是存在于天然植物中的一种三萜类化合物，具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应，熊果酸还具有明显的抗氧化功能，因而被广泛地用作医药和化妆品原料。熊果酸临床表现有显著而迅速降低谷丙转氨酶、血清转氨酶、消退黄疽、增进食欲、抗纤维化和恢复肝功能的作用，具有见效快、疗程短、效果稳定的特点。齐墩果酸在植物中存在很广泛，一般含量0.2％～2％，为广谱抗菌药，临床上用于护肝降酶，治疗支气管炎、肺炎、急性扁桃体炎、牙周炎、菌痢、急性肠胃炎、泌尿系统感染。另外，临床上还用于治疗急性肝炎。

楤木(Aralia chinensis)，是伞形目五加科植物，具有祛风除湿，利尿消肿，活血止痛等作用，能用于肝炎，淋巴结肿大，肾炎水肿，糖尿病，胃痛，风湿关节痛，腰腿痛，跌打损伤等疾病的治疗。苹果皮是蔷薇科苹果属植物苹果(Malus domestica)的果皮，苹果皮中含有丰富的抗氧化成分及生物活性物质，吃苹果皮对健康有益。枇杷叶为蔷薇科枇杷属植物枇杷(Eriobotrya japonica Thunb.)的干燥叶有清肺止咳，和胃利尿，止渴的功效以及有治疗肺热痰嗽，咳血，衄血，胃热呕哕作用。齐墩果酸是楤木中的主要活性成分，熊果酸与齐墩果酸为苹果皮和枇杷叶中重要的活性成分。

楤木全国分布广泛，作为药材早被各地民间采用，楤木中齐墩果酸的含量非常高，在西部大开发、退耕还林、荒山造林中，应积极开发这一资源。我国是世界最大的苹果生产国和消费国，在日常消费和加工苹果时，会产生大量的苹果皮。苹果皮如果不处理好，将产生严重的环境污染问题。熊果酸是苹果皮中含量最丰富的五环三萜类化合物，近年来成为研究热点。中国是世界上最主要的枇杷叶生产国，在长江以南的各省皆有种植，因此枇杷叶资源非常丰富。然而，大多数枇杷叶仍作为垃圾处理，如果处理不当，如焚烧，还会污染环境。枇杷叶中熊果酸和齐墩果酸的含量较高，通过对枇杷叶的有效活性成分的深加工提取纯化研究使其“变废为宝”，那么其市场前景必然非常乐观。因此，大力开发富含熊果酸以及齐墩果酸的植物，将具有良好的经济效益和社会意义。

目前，熊果酸和齐墩果酸的提取主要通过硅胶柱层析，硅胶柱层析操作繁琐，步骤较多，过程缓慢增加生产周期，得到目标物熊果酸和齐墩果酸耗时长，成本高，难以得到广泛应用。pH区带精制逆流色谱(pH-zone-refining countercurrent chromatography)是由普通逆流色谱发展而来的一种特殊分离技术，具有进样量大(达到克级)、分离纯度高、分离时间短等优点。该技术突出的特点是在固定相中加入了保留酸或碱，在流动相中加入了洗脱碱或酸，根据分离物质的解离常数(pK_a)及疏水性的差异而实现分离，目标组分以矩形峰被洗脱出来，而杂质则被富集在矩形峰边缘，并且不同组分被洗脱出来伴随着pH值的变化。主要应用于有机酸碱衍生物、多肽类、有机染料、生物碱、同分异构体、游离肽等制备性分离。

(三)发明内容

本发明的目的是提供一种制备性分离熊果酸和齐墩果酸的方法，快速地将熊果酸和齐墩果酸两种物质从植物中分离出来，工艺简单，具有更强的目的性，快捷高效。

本发明的技术方案如下：

一种从植物中分离熊果酸和齐墩果酸的方法，所述方法为：