[发明专利]猫类多重遗传病筛查的方法、引物和试剂盒

说明书

本发明公开了一种猫类多重遗传病筛查的方法，所述方法包括步骤：1)获取来自猫的含有DNA的样品；2)从所述含有DNA的样品中提取DNA；3)构建二代测序文库，得到含有需要检测的20个DNA靶点的DNA片段，使用的引物如下：SEQ ID NO.1‑40，其中所述引物每两个依次组成正向引物和反向引物；4)对文库进行测序；5)分析测序数据，得到40个疾病位点的DNA突变情况；6)根据突变情况预测或者诊断疾病。本发明还公开了用于猫类多重遗传病筛查的引物和试剂盒。

技术领域

本发明属于基因检测领域，特别涉及一种猫类多重遗传病筛查的方法和试剂盒。

背景技术

猫类遗传病筛查的方法目前主要分为两大类，第一类：通过临床表征结合生化实

验方法对猫类遗传病进行诊断；第二类：通过PCR和Sanger测序对引起遗传病的突变位点定性鉴定。

上述两类产品的技术缺点如下：第一类：1)只有疾病发作时才能检测出来，往往丧失了预防，延缓以及治疗的黄金时间；2)很多遗传疾病在发病期症状很相似，甚至在做完很多种临床表征检查或者生化检测后都很难确诊出具体病症；3)猫类不像人类可以用语言描述其真实感受，给疾病确诊带来了更大的挑战。第二类：1)PCR和Sanger测序的成本很高，如果猫类需要全面筛查几十甚至上百种遗传病，往往成本太大而难以实现2)全面筛查多种疾病的时候需要大量的猫类唾液或者血液样本，给采样带来很多麻烦。

因此，本领域中需要一种猫类多重遗传病筛查的方法和试剂盒。

发明内容

本发明通过唾液DNA提取，加上靶向高通量测序试剂盒，来达到对20个疾病位点的检测。 因此，在第一方面，本发明提供了一种猫类多重遗传病筛查的方法，所述方法包括步骤：

1)获取来自猫的含有DNA的样品；

2)从所述含有DNA的样品中提取DNA；

3)构建二代测序文库，得到含有需要检测的20个DNA靶点的DNA片段，使用的引物 如下：

4)对文库进行测序；

5)分析测序数据，得到20个疾病位点的DNA突变情况；

6)根据突变情况预测或者诊断疾病。

在一个实施方案中，所述含有DNA的样品为来自猫的唾液。

在一个实施方案中，在步骤4)中使用Illumina二代测序仪进行测序。

在第二方面，本发明提供了一种猫类多重遗传病筛查的试剂盒，所述试剂盒包括

如下引物：SEQ ID NO .1-40，其中所述引物每两个依次组成正向引物和反向引物。

在一个实施方案中，所述试剂盒还包括获取来自猫的含有DNA的样品的试剂，所述样品优选为唾液。

在一个实施方案中，所述试剂盒还包括从样品中提取DNA的试剂。

在一个实施方案中，所述试剂盒还包括对文库进行测序的试剂。

在第三方面中，本发明还提供了一种猫类多重遗传病筛查的引物组，所述引物组

包括如下引物：SEQ ID NO .1-40，其中所述引物每两个依次组成正向引物和反向引物。

本发明的优点在于：与现有方案一相比，用DNA信息进行疾病诊断，所以准确并且有预见性，可以在疾病发病前检测出来患病风险。与现有方案二相比，因为可以通过二代测序平台同时检测多个位点，从而极大的降低了成本，提高了检测速度，并减少了对初始DNA样本量的要求。