[发明专利]一种增强氨基柱稳定性的方法

说明书

本发明提供了一种增强氨基柱稳定性的方法，能够明显增强氨基柱的使用稳定性和重复性。本发明中先用磷酸盐/甲醇溶液作为流动相冲洗氨基柱，再用水/甲醇溶液作为流动相冲洗氨基柱，使柱表面得以稳定，从而获得良好的使用稳定性。本发明增强氨基柱稳定性的方法可使基于氨基柱的分离分析获得良好的重现性、降低使用蒸发光散射检测器时的基线噪音并提供更好的分离选择性，对氨基柱的应用具有十分重要的价值，同时也是色谱研究的一个重要方向。

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及一种增强氨基柱稳定性的方法。

技术背景

氨基柱被广泛用于色谱分离分析当中，如糖和某些极性药物、药物辅料等。但是氨基柱存在稳定性和重现性差、寿命短等问题。虽然氨基柱存在上述弊端，而且新型HILIC固定相不断推陈出新，但氨基柱因其独特的选择性而无法被完全替代。因此，增强氨基柱的稳定性对其应用具有十分重要的价值，同时也是色谱研究的一个重要方向。

目前，增强氨基柱稳定性的方法主要从两方面入手。其一是在填料制备工艺上进行改进，如TOSOH公司的TSKgel NH₂-100和Welch公司的Ultimate XB-NH₂，但是这两种氨基柱在对山梨醇和甘露醇的ELSD分析检测中仍具有较高的基线噪音和较差的分离选择性，而这种差的分离分析结果则源自于氨基柱的不稳定性。其二是采用合适的流动相对色谱柱进行冲洗，但是采用欧洲药典中异丙醇冲洗的方法不仅耗时(低流速下连续冲洗10h)，而且在对山梨醇和甘露醇的ELSD分析检测中仍无法获得满意的结果。因此，为加速和拓展氨基柱的应用，促进其色谱研究及相关领域的发展，需要开发一种能够有效增强氨基柱稳定性的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种增强氨基柱稳定性的方法。

本发明的目的通过以下技术方案实现：首先，配制一定物质的量浓度的磷酸盐溶液；然后，将该磷酸盐溶液与甲醇以一定的体积比混合作为流动相冲洗氨基柱；最后，采用一定体积比的水/甲醇溶液作为流动相冲洗氨基柱。

所述氨基柱是以硅胶为基质，键合有氨基官能团的色谱固定相。

所述磷酸盐为磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾中的一种或二种以上。

所述磷酸盐溶液的物质的量的浓度为0.01～100mM。

所述磷酸盐/甲醇溶液为磷酸盐溶液与甲醇按照体积比为1/99～99/1配制而成。

所述磷酸盐/甲醇溶液作为流动相冲洗氨基柱的流速为0.01～100mL/min，冲洗1～100个柱体积。

所述水/甲醇溶液为水和甲醇按照体积比为1/99～99/1配制而成。

所述水/甲醇溶液作为流动相冲洗氨基柱的流速为0.01～100mL/min，冲洗1～100个柱体积。

实验证明，本发明能够快速、有效增强氨基柱的使用稳定性，可使基于氨基柱的分离分析获得良好的重现性、降低使用蒸发光散射检测器时的基线噪音并提供更好的分离选择性，对氨基柱的应用及其在色谱领域的发展将起到良好的促进作用。

附图说明

图1为本发明实施例1所述的采用本发明前后R5-NH₂柱(4.6×150mm)的重现性对比图。

图2为本发明实施例2所述的采用本发明前后R5-NH₂柱(4.6×150mm)的分离分析效果对比图。

图3为本发明实施例3所述的采用本发明前后其他不同品牌氨基柱(4.6×150mm)的分离分析效果对比图。

具体实施方式