[发明专利]卡贝缩宫素的合成方法

说明书

本发明属于氨基酸技术领域，公开了一种卡贝缩宫素的合成方法，其包括如下步骤：以Fmoc‑Gly‑OH以及氨基树脂Rink Amide‑MBHA Resin为起始原料，首先使用20% DBLK溶液脱除Fmoc保护基，进行缩合，得到Fmoc‑Gly‑Rink Amide‑MBHA Resin，然后依次连接Fmoc保护氨基酸，连接完成后脱除Fmoc保护基，与4‑溴丁酸进行缩合；然后使用弱酸体系脱除半胱氨酸上的Mtt保护基，再进行环化，得到卡贝缩宫素肽树脂，然后对肽树脂进行切割，将得到的粗肽进行纯化，即得到卡贝缩宫素的纯肽。本发明方法简单可行，操作方便，适合规模化生产。

技术领域

本发明属于氨基酸技术领域，具体涉及卡贝缩宫素的合成方法。

背景技术

目前，关于卡贝缩宫素的合成已有相关文献报道。其具体合成方法总的来说分为液相合成以及固相合成两种。其中液相合成由于合成难度以及合成成本、纯化成本较高，相关报道较少。

专利CN102477082 A杭州和锦科技有限公司介绍了一种液相合成法合成卡贝缩宫素的方法。该方法首先是分别合成中间体Ⅰ:4-Bromobutyryl-Tyr(Me)-Ile-OH，中间体Ⅱ:H- Gln(Trt)-Asn (Trt) -Cys(Trt) -Ome和中间体Ⅲ：H-Pro-Leu-Gly-NH₂,中间体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ在溶剂中，缩合剂存在下缩合成未成环产品Ⅳ，最后在碱性条件下加入催化剂环化，得到卡贝缩宫素。专利报道该液相合成缩宫素的方法得率85%以上，产品纯度80%以上，且杂质易于除去。但是，参照其合成线路发现，在合成的过程中每一步的合成都需要纯化，增大了合成的难度以及纯化的难度。

专利CN101555272 A深圳市翰宇药业有限公司介绍了一种固相制备卡贝缩宫素的方法。该发明首先由Fmoc-Gly-OH和替代度为0.2-0.9mmol/g的氨基树脂反应得到Fmoc-Gly-氨基树脂；通过固相合成法依次连接具有Fmoc保护基团的氨基酸，得到的卡贝缩宫素前体肽Ⅰ-氨基树脂；脱掉半胱氨酸侧链保护基，得到卡贝缩宫素前体肽Ⅱ-氨基树脂；加入有机碱，氯化锂，环化，得到卡贝缩宫素-氨基树脂；裂解，得到卡贝缩宫素粗肽；纯化、冻干得到卡贝缩宫素。

专利CN102146122 A深圳市健元医药科技有限公司介绍了一种具有缩宫作用药物的生产工艺。该发明与专利CN101555272A的合成线路相似。首先由Fmoc-Gly-OH和氨基树脂反应得到Fmoc-Gly-氨基树脂；依次通过固相合成法连接剩余保护氨基酸，脱掉半胱氨酸侧链保护基，在半胱氨酸的巯基上接入溴丁酸后脱除末端氨基Fmoc保护；进行固相环化后切割树脂得到卡贝缩宫素粗肽；最后经过纯化、冻干得到卡贝缩宫素纯品。

专利CN102167723 B上海苏豪逸明制药有限公司介绍了一种多肽合成卡贝缩宫素的制备方法。该方法采用Rink Amide MBHA Resin为起始原料，以Fmoc保护的氨基酸为单体，依次连接氨基酸，其中Cys采用Fmoc-Cys(CH₂CH₂COOR)-OH，最后一个氨基酸使用Fmoc-Tyr(Me)-OH，得到保护的九肽树脂后，脱掉Tyr上的Fmoc氨基保护基，切割树脂得到直链肽粗品，然后加入BOP/HOBt/DMF进行成环反应，采用制备型HPLC进行分离纯化，得到目标产物。

专利CN102260326 A成都圣诺科技有限公司介绍了卡贝缩宫素的制备方法。该方法采用了新型的巯基保护氨基酸Fmoc-Cys(CH₂CH₂CH₂COOAll)-OH。首先以氨基树脂为起始树脂载体，依次接入卡贝缩宫素氨基酸序列中相对应的Fmoc-保护氨基酸得到线形卡贝缩宫素树脂，脱去侧链烯丙基，脱去Fmoc保护基，然后环化得到卡贝缩宫素树脂。最后经过切割、纯化得到目标产物。同时，成都圣诺科技有限公司的注册申请已发批件。