[发明专利]一种高频诱导黄山苦茶组培苗生根的方法

权利要求书

1.一种高频诱导黄山苦茶组培苗生根的方法，包括初代培养、增殖培养、生根培养，其特征在于：所述初代培养为春季、秋季取黄山苦茶当年生幼嫩新梢，先用洗衣粉水洗去表面灰尘污渍，再流水冲洗1小时；在无菌操作条件下，先用75%酒精消毒30s，无菌水漂洗3次，再用0.1%HgCl₂+0.1%吐温-20消毒4min，无菌水漂洗5次，最后用无菌吸水纸将材料表面的水吸干，外植体接种在MS+0.5mg/L KT+2.0mg/L NAA+卡那胶5.8g/L+蔗糖30g/L的培养基上，培养30天；所述增殖培养为待腋芽萌发并伸长至2cm时，将其剪下，进行增殖培养，增殖培养的培养基为：MS+0.1mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA+卡那胶5.8g/L+蔗糖30g/L，培养30天；所述生根培养为待组培苗长至3厘米，选取生长健壮的组培苗，在无菌操作条件下，用浓度为500mg/L的吲哚丁酸溶液浸泡组培苗的基部10min，后转入生根培养基中，生根培养基为1/2MS+1.0mg/L IBA+2.0mg/L IAA+1g/L活性炭+卡那胶5.8g/L+蔗糖20g/L，培养30天；所述生根培养的光照为红光。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）初代培养：将带有黄山苦茶腋芽幼嫩茎段，先用洗衣粉水洗去表面灰尘污渍，再流水冲洗1小时，在无菌操作条件下，先用75%酒精消毒30s，无菌水漂洗3次，再用0.1%HgCl₂+0.1%吐温-20消毒4min，无菌水漂洗5次，最后用无菌吸水纸将材料表面的水吸干，将外植体接种在MS+0.5mg/L KT+2.0mg/L NAA+卡那胶5.8g/L+蔗糖30g/L的培养基上，光照18h/d,黑暗6h/d,23摄氏度，培养30天；

（2）增殖培养：待腋芽萌发并伸长至2cm时，将其剪下，进行增殖培养，增殖培养的培养基为：MS+0.1mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA+卡那胶5.8g/L+蔗糖30g/L，光照18h/d,黑暗6h/d,23摄氏度，培养30天；

（3）生根培养：待组培苗长至3厘米，选取生长健壮的组培苗，在无菌操作条件下，用浓度为500mg/L的吲哚丁酸溶液浸泡组培苗的基部10min，后转入诱导生根培养基中，生根培养基为1/2MS+1.0mg/L IBA+2.0mg/L IAA+1g/L活性炭+卡那胶5.8g/L+蔗糖20g/L，光照18h/d,黑暗6h/d,23摄氏度，培养30天。