[发明专利]一种灯芯式纸微流控三维细胞培养纸芯片、制备方法及其在药物筛选中的应用

权利要求书

1.一种灯芯式纸微流控三维细胞培养纸芯片，其特征在于：所述的灯芯式纸微流控三维细胞培养装置由两层印有不同通道的下层纸芯片和上层纸芯片按设计图案对齐后叠加粘贴而构成：

所述下层纸芯片设置有浸润区，以所述浸润区为起点分别向外延伸出长型流通通道，将所述的长型流通通道的外延端折叠形成灯芯式纸柱，用于培养基的自主持续供液；所述浸润区和流通通道为亲水区，其余区域为疏水区；

所述的上层纸芯片设置有与下层浸润区相同数量相同图案的细胞培养区，用于细胞接种与培养；所述培养区为亲水区域，其余区域为疏水区；

上层纸芯片和下层纸芯片对应层叠组装后，上层的每个细胞培养区分别对应覆盖下层的浸润区。

2.如权利要求1所述的灯芯式纸微流控三维细胞培养纸芯片，其特征在于，所述的下层纸芯片的流通通道与外延伸段等宽，且外延伸段在与芯片接触处可折叠形成灯芯式纸柱。

3.如权利要求1所述的灯芯式纸微流控三维细胞培养纸芯片，其特征在于，所述的上层纸芯片的细胞接种区设置有多个接种孔，所述接种孔数量可根据所需进行增减。

4.如权利要求1所述的灯芯式纸微流控三维细胞培养纸芯片，其特征在于，所述的下层纸芯片材料和上层纸芯片材料分别为大孔径和小孔径的不同型号的滤纸。

5.如权利要求1灯芯式纸微流控三维细胞培养纸芯片的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

步骤1：根据纸芯片图案，在滤纸的相应疏水区均布蜡层疏水材料，通过烘烤制成含亲疏水区域的上层纸芯片和下层纸芯片；

步骤2：将上层纸芯片与下层纸芯片对应层叠组装，上层的每个细胞培养区分别对应覆盖下层的浸润区，折叠下层纸芯片流通通道的延长段形成灯芯式纸柱，得到灯芯式纸微流控三维细胞培养装置；

步骤3：将上述步骤2的双层纸装置灭菌后室温储存制得。

6.如权利要求1所述的灯芯式纸微流控三维细胞培养纸芯片在药物筛选中的应用。

7.如权利要求6所述的灯芯式纸微流控三维细胞培养纸芯片在药物筛选中的应用，其特征在于，所述应用方法包括以下步骤：

(1)配置不同的含药培养基和不同浓度的细胞悬浮液；

(2)用胶原蛋白浸润上层纸芯片的培养区，下层纸芯片折叠灯芯纸柱浸入含药培养基，通过毛细作用运输至上层培养区；

(3)将细胞悬液接种于培养区培养，培养后滴加染色试剂反应显色；

(4)显色结果由拍照获得，再由软件读取培养区颜色灰度的平均值，得到显色强度与不同细胞接种量之间的关系，显色强度与不同药物之间的对应关系。