[发明专利]一种促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法

说明书

本发明具体涉及一种促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，包括如下步骤：(1)三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)溶液的制备；(2)多巴胺溶液的制备；(3)聚丙烯酰胺水凝胶的改性：将聚丙烯酰胺水凝胶浸泡在步骤(2)制备的多巴胺溶液中孵育；(4)纯水清洗；(5)用VEGF溶液处理。本发明对聚丙烯酰胺水凝胶进行的改性，细胞生物相容性好，与直接在聚丙烯酰胺水凝胶上面种植细胞相比，细胞生长状态明显发生变化，改性前的水凝胶上细胞基本不铺展，而改性后的水凝胶上细胞正常铺展和生长。此改性方法简单易操作，而且性能稳定，对于体外研究聚丙烯酰胺水凝胶有着非常重要的作用。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种能够促进生物材料上细胞生长的方法，具体涉及一种促进水凝胶上细胞生长的方法。

背景技术

交通事故，自然灾害，战争和临床手术事故引起的周围神经损伤是一种常见的临床症状，目前临床周围神经缺损仍然采用传统的自体神经作为神经桥接物。虽然人们已经研制的人工神经移植物在修复周围神经缺损中取得了一定的修复效果，但人工神经移植物修复周围神经缺损的效果与自体神经移植相比还有较大的差距。研究发现材料表面弹性对于组织再生具有重要影响作用，但弹性对于周围神经再生的具体影响作用还缺乏系统的研究。

聚丙烯酰胺水凝胶因其良好的力学性能及可加工性在组织工程与再生医学中具有广泛的研究和应用，可以作为力学模型用于研究弹性跟组织再生之间的关系。而表面的弹性是构成组织再生过程中微环境的一个重要因素。聚丙烯酰胺水凝胶常用于体外培养细胞模型，但是从培养的效果来看，存在一些问题，例如细胞粘附性差，而且不容易铺展，这对于建立体外培养细胞模型来说是非常受影响的。因此，对于上述存在的问题，我们提出了一种促进聚丙烯酰胺水凝胶表面细胞粘附和铺展的方法。

本方法提供了一种能够促进细胞在聚丙烯酰胺水凝胶上生长的方法。具体是以多巴胺和VEGF为介质，对水凝胶进行改性。将水凝胶浸泡在多巴胺溶液中，用纯水冲洗多次过后，再用VEGF溶液处理。与直接在水凝胶上面种植细胞相比，细胞生长状态明显发生变化，改性前的水凝胶上细胞基本不铺展，而改性后的水凝胶上细胞正常铺展和生长。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于研究出一种能够促进生物材料上细胞生长的方法，本发明提供的这种方法，具有良好的稳定性。

技术方案：本发明的技术方案如下：

本发明提供了一种促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，方法中涉及了三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)粉末，多巴胺粉末还有VEGF溶液。

本发明提供了一种促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，具体步骤如下：

步骤1三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)溶液的制备：称取三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)粉末，制备成为Tris溶液；

步骤2多巴胺溶液的制备：在步骤1中得到的Tris溶液中加入多巴胺粉末，将其配制成多巴胺溶液；

步骤3聚丙烯酰胺水凝胶的改性：将步骤2中获得的多巴胺溶液去浸泡水凝胶，避光孵育；

步骤4纯水清洗：将步骤3中浸泡过的水凝胶用水多次冲洗表面；

步骤5用VEGF溶液处理：将步骤4中冲洗过的水凝胶表面加入VEGF，静置于超净台下等待吹干，得到改性以后的水凝胶。

在本发明的一种实施方式中，所述水为去离子水。

在本发明的一种实施方式中，所述步骤1为在去离子水中加入三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)粉末，搅拌溶解，制成Tris溶液

在本发明的一种实施方式中，所述步骤2中多巴胺溶液的浓度为2mg/mL。

在本发明的一种实施方式中，所述步骤3中多巴胺避光孵育24h。