[发明专利]载PDGF微球的温敏壳聚糖水凝胶及其制备方法和应用

说明书

本发明属于制剂技术领域，具体涉及一种温敏壳聚糖水凝胶的制备方法及其制备得到的载PDGF微球的温敏壳聚糖水凝胶和其在面膜方面的应用。所述温敏壳聚糖水凝胶载PDGF，包括PDGF‑PLGA微球的制备、水凝胶的制备。所述载PDGF微球的温敏壳聚糖水凝胶易使用易操作，无病原体且生物相容性好；透明程度高，有利于观察创面愈合的情况，将所述载PDGF微球的温敏壳聚糖水凝胶应用到面膜中，可以更好的涂覆面膜以及促进所含有效的活性物质吸收。

技术领域

本发明属于制剂技术领域，具体涉及一种温敏壳聚糖水凝胶的制备方法及其制备得到的载PDGF微球的温敏壳聚糖水凝胶和其在面膜方面的应用。

背景技术

温敏性水凝胶是一种聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-B-D葡萄糖和β-甘油磷酸钠的共聚物，其在低温下为液态，高温时凝聚，这种状态的变化随温度可逆。它同时具有聚合材料的多种特征，如网络结构和高含水量，目前广泛的运用于医药生命科学等多种领域，包括但不仅限于3D培养、组织工程和药物传送这些。

创面愈合是一个复杂的过程，需要依靠修复细胞、炎性细胞、细胞外基质、多种生长因子和细胞因子协同作用来重建受损的组织，且各种因素间相互联系和相互作用，是时间与空间上高度协调的整合过程。自噬是广泛存在于真核细胞中的生命现象，被称为“Ⅱ型程序性细胞死亡”，是生物降解胞内蛋白，完成细胞器转化，保持内部环境稳定的重要方式。损伤激活自噬，自噬与血管新生和组织损伤后修复密切相关。在近年的研究中，发现自噬与LC3有关，在自噬体完全形成后，除了部分与自噬体膜腔面结合的LC3-Ⅱ外，大部分的Atg蛋白会被回收至包浆中。最后自噬体与溶酶体融合，形成自噬体溶酶体，由此降解LC3-Ⅱ和被包入其中的物质。在不少创伤疾病中，抑制自噬有利于恢复。

对于创面的修复，目前的一些产品或制剂还存在很多缺陷，比如生物相容性不好、有轻微毒性，含有病原体致使创面发生新的病变，或者遮盖了创面不易进行愈合观察以及修复效果不佳等等。因此，为克服这些缺陷，提供一种更优的创面修复制剂很有必要，基于此目的，本发明提出一种载PDGF微球的温敏壳聚糖水凝胶。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种载PDGF微球的温敏壳聚糖水凝胶的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用以下方案：

一种温敏壳聚糖水凝胶的制备方法，所述温敏壳聚糖水凝胶载PDGF，所述制备方法包括以下步骤：

1)PDGF-PLGA微球的制备：将PLGA溶于DCM，PDGF溶于PBS，二者混合乳化成初乳，初乳迅速加入到蒸馏水中，机械搅拌，固化，然后过滤清洗，冻干得所述微球，备用；

2)水凝胶的制备：将壳聚糖溶于水中，加入乳酸，充分搅拌溶解，然后放入冰浴中预冷，将提前预冷的β-甘油磷酸钠加入到壳聚糖溶液中，充分搅拌混匀后备用；

3)将步骤1)的PDGF-PLGA微球与步骤2)的水凝胶混合均匀记得所述的温敏壳聚糖水凝胶。

进一步，步骤1)所述蒸馏水可替换为0.1％甲基纤维素或1％聚乙烯醇。

优选为蒸馏水。

进一步，步骤2)所述乳酸可替换为盐酸或醋酸。

优选为乳酸。

进一步，步骤2)所述β-甘油磷酸钠的终浓度质量体积比为5％～15％。

优选为，β-甘油磷酸钠的终浓度质量体积比为7.5％。

某些实施例中，温敏壳聚糖水凝胶的制备方法为：将40mg PLGA(聚乳酸-羟基乙酸共聚物)溶于2.5ml DCM(二氯甲烷)中，将20ug PDGF溶于PBS中，二者混合乳化6000rpm，2min成初乳，初乳迅速加入到200ml蒸馏水中，机械搅拌400rpm，固化，然后过滤清洗，冻干得微球，备用。