[发明专利]用于提高多能干细胞重编程效率的方法在审
申请号: | 201910664185.9 | 申请日: | 2019-07-23 |
公开(公告)号: | CN110499293A | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | 张文胜;李鹏;吴倩鑫 | 申请(专利权)人: | 张文胜 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10 |
代理公司: | 11250 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张韬<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
地址: | 215000 江苏省苏州市苏州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 复合物 多能干细胞 重编程效率 干性 调节基因 相关基因 抑制分化 培养基 体细胞 重编程 内源 修饰 激活 引入 | ||
1.一种用于提高多能干细胞重编程效率的方法,其特征在于,包括向培养基中的多能干细胞中引入多梳抑制复合物,调节基因的H3k27me3的修饰。
2.根据权利要求1所述的一种用于提高多能干细胞重编程效率的方法,其特征在于,所述多梳抑制复合物包括PRC1复合物和PRC2复合物。
3.根据权利要求2所述的一种用于提高多能干细胞重编程效率的方法,其特征在于,在过表达不同组合的主要干性因子时,调节多梳抑制复合物主要因子的表达。
4.根据权利要求3所述的一种用于提高多能干细胞重编程效率的方法,其特征在于,所述主要干性因子包括Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc。
5.根据权利要求4所述的一种用于提高多能干细胞重编程效率的方法,其特征在于,所述多梳抑制复合物的主要因子包括Ezh2,Eed,Kdm2B和Ring。
6.根据权利要求4所述的一种用于提高多能干细胞重编程效率的方法,其特征在于,包括:
S1:选择生长状态良好的鼠胚胎成纤维细胞,经丝裂霉素C处理,作为诱导和培养诱导性多能干细胞的饲养层,取体细胞用于病毒转染制备诱导性多能干细胞;
S2:将含有四种转录因子的病毒按照1:5的比例加入培养系统中;
S3:将PRC1复合物/PRC2复合物按照1:10的比例加入培养系统中;
S4:调节Ezh2,Eed,Kdm2B和Ring依次表达。
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