[发明专利]一种‘黄油果’海棠的组培快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种‘黄油果’海棠的组培快速繁殖方法，属于植物组织培养技术领域。包括以下步骤：1)‘黄油果’海棠种子消毒；2)不定芽的诱导培养；3)不定芽的伸长培养；4)生根培养；得到生根的幼苗。本发明结合‘黄油果’海棠的生长特点，诱导过程中，在培养基中添加了合适含量的分裂素和生长素，针对性诱导‘黄油果’海棠种胚形成不定芽，增殖系数高达12。该方法操作简单，生产成本低，诱导率和增殖系数高，可以通过单粒种子诱导多棵植株，缩短育种周期，培育大量无性系植株，为‘黄油果’海棠繁育和产业化生产奠定基础。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种‘黄油果’海棠的组培快速繁殖方法。

背景技术

‘黄油果’海棠为苹果属海棠，其花量大，单瓣、花瓣卵圆形花序伞形，花径3-3.5cm，萼筒密被毛，花粉白，果量大，果皮果肉皆为黄色，果皮无光泽，叶背有毛。‘黄油果’以花量大、果量大，果皮黄色为主要观赏特性，在园林绿化中有较高的应用和观赏价值。

‘黄油果’海棠的常规繁殖方法是播种繁殖，但种子细小，发芽率较低，繁殖量有限，而扦插、分株等其它繁殖方法也鲜见报道。所以中华野海棠种苗生产不能满足市场需求。

通过组织培养快速繁殖技术，可获得优质整齐的种苗，为多种植物的快速繁殖开辟了一条有效途径。但目前关于‘黄油果’海棠组织培养未见报道。

发明内容

发明目的：针对技术的不足，本发明的目的是提供一种‘黄油果’海棠的组培快速繁殖方法，该方法操作简单，生产成本低，诱导率和增殖系数高，可以通过单粒种子诱导多棵植株，缩短育种周期，培育大量无性系植株。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

一种‘黄油果’海棠的组培快速繁殖方法，包括以下步骤：

1)‘黄油果’海棠种子消毒；

2)不定芽的诱导培养

消毒后的海棠种子剥去外种皮，将胚接入诱导培养基上，诱导培养基为：1/2MS+0-1.5mg/L 6-BA+0-0.2mg/L TDZ+0-0.4mg/L KT+0.1-0.2mg/LNAA+7g/L琼脂+30g/L蔗糖，pH为5.8±0.2；

3)不定芽的伸长培养

将步骤2)得到的不定芽接入伸长培养基上，伸长培养基为：MS+0.5-1.5mg/L6-BA+0.1-0.5mg/L NAA+7g/L琼脂+30g/L蔗糖，pH为5.8±0.2；

4)生根培养

将生长健壮，长度超过2cm的不定芽转入生根培养基：1/2MS+0.5mg/L IBA+7g/L琼脂+30g/L蔗糖，pH为5.8±0.2内，培养2个月，得到生根的幼苗。

步骤1)中‘黄油果’海棠种子的消毒步骤为：使用75％酒精浸泡1min，无菌水清洗3次，25％次氯酸钠浸泡8min，无菌水清洗5次，使用无菌滤纸吸去多余水分。

步骤2)中诱导培养基为：1/2MS+0.2mg/L TDZ+0.4mg/L KT+0.2mg/L NAA+7g/L琼脂+30g/L蔗糖，pH为5.8±0.2。

步骤2)中培养条件为暗培养0-25天后，转光培养20-45天，光照强度1200lx，时长16h/d。

步骤2)中培养条件为暗培养25天后，转光培养20天，光照强度1200lx，时长16h/d。

步骤3)中伸长培养基为：MS+0.5mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+7g/L琼脂+30g/L蔗糖，pH为5.8±0.2。

步骤3)中培养条件为暗培养25天后，转光培养20天，光照强度1200lx，时长16h/d。