[发明专利]一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢的制备、富集方法

权利要求书

1.一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，制备方法包括以下步骤：

S1、菌种活化：

将嗜热脂肪地芽孢杆菌的菌种在活化培养基上进行划线培养得到活化的菌种；

S2、芽孢制备：

将活化的菌种菌落溶解到无菌去离子水中，制成菌悬液，随后加入到产孢培养基中进行芽孢的摇床培养，得到嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢。

2.根据权利要求1所述的一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，所述活化培养基，包括以下重量百分比的组成：大豆蛋白胨0.5％，胰蛋白酶胨1.5％，氯化钠0.5％，琼脂1.5％，蒸馏水补足至100％。

3.根据权利要求2所述的一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，所述活化培养基的pH为7.3± 0.2，且在121℃下灭菌20-30min后冷却至室温，待用。

4.根据权利要求1所述的一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，所述产孢培养基，包括以下重量百分比的组成：蛋白胨0.5％，氯化钠0.25％，牛肉浸出粉0.15％，氯化钙0.0025-0.005％，氯化锰0.0025-0.005％，磷酸氢二钾0.0025%，酵母粉0.5%，蒸馏水补足至100％。

5.根据权利要求4所述的一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，所述产孢培养基的pH为6.6-7.4，且在121℃下灭菌20-30min后冷却至室温，待用。

6.根据权利要求1所述的一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，所述步骤S1中划线培养的倒置培养温度为55-65℃，培养时间为12-24h。

7.根据权利要求1所述的一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，所述无菌去离子水的灭菌方式为121℃下灭菌20-30min。

8.根据权利要求1所述的一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，所述步骤S2中芽孢的培养温度为55-65℃，培养时间为16-20h；摇床培养转速为150-180rpm/min。

9.根据权利要求1-8任一所述的一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，富集方法包括以下步骤：

A1、离心包含芽孢的产孢培养基，弃去上清液，继续加入无菌去离子水震荡均匀后离心，

A2、重复上述步骤A1若干次至上清液澄清；

A3、添加一定量的去离子水重悬移置冻存管中低温存储。

10.根据权利要求9所述的一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，其特征在于，所述步骤A1中离心转速为7500-8500rpm/min，离心温度4-6˚C，离心时间10-18min;步骤A2中的重复为3-5次，步骤A3中的去离子水为2-6ml，存储温度为0-4˚C。