[发明专利]一种噬菌体保护剂及其应用

说明书

本发明涉及一种噬菌体保护剂及其应用，所述噬菌体保护剂包括以下组分：菊粉、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮和脱脂奶粉。所述噬菌体保护剂还可以包括海藻酸钠。将噬菌体保护剂应用于噬菌体HS15、副溶血性弧菌噬菌体或溶藻弧菌噬菌体等的保护中，可使得噬菌体在常温下具有良好的存活率，由于是通过添加海藻酸钠制备成微囊后，可显著提升噬菌体在室温甚至37℃下的存活效果。有效地解决了噬菌体只能在低温下保存的问题，且能够适用于多种噬菌体的保存。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种噬菌体保护剂及其应用。

背景技术

抗生素的滥用导致的超级细菌及食品中药物残留的问题引起了世界的广泛关注，多国政府也颁布了相应的法律法规或措施推进“无抗进程”。噬菌体是感染细菌、真菌、藻类、放线菌或螺旋体等微生物的病毒总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。由于其具有安全、高效、特异性强、自我增殖快、筛选周期短等优点，因此，近年来关于将噬菌体作为抗菌制剂的研究受到了普遍关注，尤其是在医学、养殖和食品等领域的应用受到了国内外学者的广泛关注，成为了当前的研究热点之一。相继出现了噬菌体制剂产品在食品加工及保鲜、动物生产、水质净化以及人类临床中得到应用，由此可见，噬菌体的发展前景非常广阔。然而，在噬菌体的应用过程中，由于噬菌体容易被污染，并且必须在低温条件下(2～8℃)保存，使得噬菌体发展极大程度上受到的限制，因此，噬菌体的保存技术是制约噬菌体广泛应用的重要技术难题。

海藻糖是一种由2个葡萄糖分子以1，1-苷键构成的非还原性糖，有3种异构体即海藻糖(α，α)、异海藻糖(β，β)和新海藻糖(α，β)，并对多种生物活性物质具有非特异性保护作用。由于海藻糖在高温、高寒、高渗透压及干燥失水等恶劣环境条件下在细胞表面能形成独特的保护膜，有效地保护蛋白质分子不变性失活，从而维持生命体的生命过程和生物特征。因此，与其他功能性低聚糖相比，海藻糖玻璃化温度更高、吸湿性更低且无还原性，具有更广泛的应用前景。中国发明专利申请文件CN201610415395.0公开了一种噬菌体保存保护剂及其制备方法与应用，其中，该保存保护剂中含有海藻糖等多种成分且制备工艺复杂，因此，找出一种成分及制备工艺简单的噬菌体保护剂具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是：提供一种成分及制备工艺简单的噬菌体保护剂。

本发明所要解决的第二个技术问题是：提供一种上述噬菌体保护剂的应用。

为了解决上述第一个技术问题，本发明采用的技术方案为：一种噬菌体保护剂，所述噬菌体保护剂包括以下组分：菊粉、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮和脱脂奶粉。

进一步地，所述噬菌体保护剂还包括海藻酸钠和羧甲基纤维素钠。

进一步地，所述海藻酸钠与羧甲基纤维素钠的质量比为1:(0.5～1.5)；优选为1:1。

优选地，所述保护剂溶解在缓冲液中，所述菊粉的质量浓度为(50～150)g/L；优选地，所述菊粉的质量浓度为(100～150)g/L。

进一步地，所述缓冲液为SM缓冲液；优选地，所述SM缓冲液按照常规方法配制，具体组成如下：NaCl 5.89g，MgSO₄·7H₂O 29g，Tris-HCl(1mol/L，pH7.5)50ml，2％明胶5ml，蒸馏水1000ml。

本发明的有益效果在于：本发明方案通过将菊粉及海藻糖等功能性低聚糖复配作为保护剂可以增强噬菌体对环境温度变化带来的损伤的抵御能力，提高了其存活率，能够适用于多种噬菌体；本发明方案的保存剂组分简单，降低了生产成本及技术复杂性，且本发明方案的保护剂使得噬菌体能在室温下仍保持较高的存活率，克服了传统技术中的噬菌体仅能在低温下保存的局限，降低了噬菌体运输及仓储过程中的成本。

为了解决上述第二个技术问题，本发明采用的技术方案为：一种噬菌体制剂，所述制剂包括上述保护剂和噬菌体。