[发明专利]棉花纤维长度相关microRNA396及其前体DNA和应用

说明书

本发明公开了一种棉花纤维长度相关microRNA及编码该棉花纤维长度相关microRNA的前体DNA，所述棉花纤维长度相关microRNA序列为如SEQ ID NO：1所示的核酸序列或由SEQ ID NO：1所示序列经过一个或几个核酸的取代和/或缺失和/或添加且与棉花纤维长度相关的衍生的核酸序列。本发明提供的棉花纤维长度相关microRNA及其前体DNA，将前体DNA导入棉花，可以显著提高棉花纤维长度。本发明对于培育棉花新品种具有重要的意义，适合于推广应用。

技术领域

本发明涉及棉花纤维长度相关microRNA及其前体DNA和应用，属于生物技术领域。

背景技术

我国是世界上棉花种植面积最大，棉花纤维消费量最多的国家。棉花纤维也是一个很好的研究单细胞生长发育的模型(Chen et al. 2007b; Wendel et al. 2003)。世界上95 %以上的棉花是由陆地棉产生的，这是因为它具有广泛的适应性和较高的产量，而其余5 %的棉花产量主要来自海岛棉，海岛棉的纤维具有超高的长度、强度以及更细的马克隆值。棉纤维是从棉籽的表皮中分化出来的单细胞，每粒棉籽都含有大约25000个细胞可以发育成纤维细胞(Kim et al. 2001; Lee et al. 2007)。棉纤维长度有的可达到3~5 cm。棉纤维的主要成份是纤维素，其含量可以达到95 %以上。棉花纤维细胞的这些特性使棉纤维成为研究细胞分化和细胞快速伸长以及研究纤维素生物合成和利用的一个很好的模型。长纤维高比强低马克隆值的棉花纤维是棉花育种的主要目标。

目前棉花纤维发育过程中miRNA的功能研究进展缓慢，尽管一系列的研究已经发现miRNAs在调节纤维发育中的作用，但很少有研究对某一个miNRAs在棉花纤维中的确切功能进行研究。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了棉花纤维长度相关microRNA及其前体DNA和应用，具体采用如下技术方案：

棉花纤维长度相关microRNA，获自棉花，命名为MIR396，其序列为如SEQ ID NO ：1所示的核酸序列；

或，由SEQ ID NO ：1所示序列经过一个或几个核酸的取代和/或缺失和/或添加且与棉花纤维长度相关的衍生的核酸序列。

上述microRNA的核酸序列可人工合成，也可直接在棉花中克隆得到，如通过将SEQID NO ：1所示的核酸序列中缺失一个或几个核酸，和/或进行一个或几个碱基对的突变得到。

本发明还提供了编码上述棉花纤维长度相关microRNA的前体DNA，其基因序列为以下的任意一种DNA分子：

（1）编码区如SEQ ID NO ：2所示的DNA分子；

（2）与（1）中DNA分子杂交且编码与棉花纤维长度相关microRNA的DNA分子；

（3）与（1）或（2）中DNA分子具有90%以上同源性且编码与棉花纤维长度相关蛋白的DNA分子。

进一步的，（2）与SEQ ID NO ：2所示的DNA分子杂交的条件为0.1×SSPE (或 0.1×SSC)，0.1％SDS的溶液，在DNA或者RNA 杂交实验中65℃下杂交并洗膜。

本发明还提供了上述前体DNA在制备重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌中的应用。