[发明专利]一种鉴定甜瓜品种真实性的方法及其专用SSR引物组合有效
| 申请号: | 201910639456.5 | 申请日: | 2019-06-28 | 
| 公开(公告)号: | CN110331226B | 公开(公告)日: | 2021-02-02 | 
| 发明(设计)人: | 温常龙;张建;罗江;杨静静;刘慧;董波波;许勇 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 | 
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11;C12Q1/6858 | 
| 代理公司: | 北京五洲洋和知识产权代理事务所(普通合伙) 11387 | 代理人: | 荣红颖;王蔚林 | 
| 地址: | 100097 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 鉴定 甜瓜 品种 真实性 方法 及其 专用 ssr 引物 组合 | ||
1.鉴定甜瓜品种真实性的SSR引物组,其特征在于,所述SSR引物组包括:
第一SSR引物对,序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;
第二SSR引物对,序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示;
第三SSR引物对,序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示;
第四SSR引物对,序列如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示;
第五SSR引物对,序列如SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示;
第六SSR引物对,序列如SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示;
第七SSR引物对,序列如SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示;
第八SSR引物对,序列如SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16所示;
第九SSR引物对,序列如SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示;
第十SSR引物对,序列如SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20所示;
第十一SSR引物对,序列如SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22所示;
第十二SSR引物对,序列如SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24所示;
第十三SSR引物对,序列如SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26所示;
第十四SSR引物对,序列如SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28所示;
第十五SSR引物对,序列如SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30所示;
第十六SSR引物对,序列如SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32所示;
第十七SSR引物对,序列如SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34所示;
第十八SSR引物对,序列如SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36所示;
第十九SSR引物对,序列如SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38所示;
第二十SSR引物对,序列如SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40所示;
第二十一SSR引物对,序列如SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42所示;
第二十二SSR引物对,序列如SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:44所示;
第二十三SSR引物对,序列如SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46所示。
2.根据权利要求1所述SSR引物组,其特征在于:
每对所述引物对的一条引物连接有荧光分子。
3.根据权利要求2所述SSR引物组,其特征在于:
所述荧光分子选自ROX、TAMRA、FAM、HEX。
4.鉴定甜瓜品种真实性的SSR试剂盒,其特征在于:所述SSR试剂盒配制为PCR反应体系;所述PCR反应体系包括:
权利要求1-3中任一项所述SSR引物组,所述SSR引物组中的每一对的上游引物和下游引物在所述体系中浓度之比为1:1;所述上游引物和下游引物在体系中终浓度均为0.25μmol/L。
5.根据权利要求4所述的鉴定甜瓜品种真实性的SSR试剂盒,其特征在于:所述体系还包括:
dNTPs:体系中终浓度为每种0.15mmol/L,
氯化镁:体系中终浓度为2.5mmol/L,
DNA聚合酶:体系中终浓度为0.05U/μL,
PCR缓冲液:由体系中终浓度为10-50mmol/L的氯化钾与体系中终浓度为1-10mmol/L的pH7.5-9.0的Tris-HCL配制而成。
6.权利要求1-3中任一项所述SSR引物组合,或权利要求4或5所述SSR试剂盒,在以下X1或X 2的应用:
X1:鉴定待测甜瓜的品种是否属于标准甜瓜品种中的某一种;
X2:鉴定待测甜瓜的品种具体为标准甜瓜品种中的哪一种;
所述待测甜瓜的品种选自:
新红心脆,金龙,雪里红,黄皮9818,RX-99,香瑞一号,金玉,伊丽莎白,红绿早脆,鄂甜瓜5号,世纪蜜,黄冠,贮冠,雪甜一号,丰甜一号,西薄洛托,金露三号,久红瑞,久青蜜,RX-14-3,香瑞一号,玉露一号,鑫橙香,新世纪,银露一号,丰甜七号,黄晶玉,红佳,伊莉莎白,芭苏317,景甜208,香华,金利,金蜜龙,甬甜5号,东方蜜1号,翠甜1号,新辉,江淮蜜三号,红优,众天5号,白云,甘肃白兰瓜,红酥手1401,红酥手1402,艳阳,慈脆2号,江淮蜜六号,甬甜7号,甬越1号,慈溪菜瓜,甬甜8号,小白瓜,众天7号,中甜2号,众天8号,江淮蜜二号,江淮蜜一号,蜜丰一号,玉露一号,香瑞301,金妃,众云20,众天5号,瑞雪8号,丰甜7号,风味4号,热瓜旦子,风味5号,雪里红,墨香玉,白玉满堂,甜香玉,金橙,银露一号,玉如意,青酥,江淮蜜7号,西周蜜25号,众天翠雪,众天翠宝,白玉满堂,东方花脆,花脆,创研脆脆甜,日本甜宝,M16002,东之星,红玉脆,玉红,东方脆蜜,东方蜜1号,丰蜜29,西洲密25号,银蜜58,翠雪5号,香山雪蜜,伊丽莎白,京玉357,京玉280,京玉30,骄傲,京玉2008,京玉羊角酥,京玉10,京玉三号,京玉月亮,京玉绿宝,京域香帅,京玉墨宝,京玉白流星,京玉黄流星,京玉5号,京玉四号,京玉2号,玉美人,伊丽莎白,甜冠三号,京御蜜28,甜冠一号,甜蜜蜜,伊丽莎白,京蜜8号,京蜜10号,早熟一春,久久红,京蜜7号,京蜜15号,一特金,一特白,羊角脆,蜜脆香园,京蜜11号,春棚5号,中蜜198,IV92,精选羊角蜜,IV17,赤子牛。
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