[发明专利]基于鹿茸天然活性组分的促骨愈合材料及其制备方法

说明书

本发明涉及一种基于鹿茸天然活性组分的促骨愈合材料及其制备方法，包括如下制备步骤：(1)采用非酶解冷提法从鹿茸中提取天然活性成分鹿茸小分子多肽以及活性多糖，并从不溶性提取滤渣中获取脱脂鹿茸粉；(2)制备含纳米磷酸三钙的明胶基/脱脂鹿茸粉骨架材料；(3)制备鹿茸小分子多肽‑纳米羟基磷灰石微球复合物；(4)材料成型。与现有技术相比，本发明对鹿茸进行了深度加工利用，操作简单便捷，所得促骨愈合材料具有骨诱导作用，可促进拔牙创部位的牙槽骨成骨愈合。

技术领域

本发明属于医用组织工程材料领域，具体地说，涉及含鹿茸综合深加工制品的材料、制备方法及其应用。

背景技术

鹿茸含有多种生物活性物质，成分极其复杂，主要有无机成分及有机成分，有机成分可分为水溶性、脂溶性和不溶性物质。其中水溶性成分主要包括氨基酸、多肽、蛋白质、活性多糖等；脂溶性成分主要有磷脂、甾体化合物，以及脂肪酸、中性脂和前列腺素等。不溶性成分主要包括角蛋白、胶原蛋白等物质。

其中富含的蛋白质及多肽类，除了增强免疫功能，还具有促进机体生长发育、促进骨折愈合等效果。此外鹿茸还富含有硫酸软骨素类多糖。现有研究表明，鹿茸多肽在骨再生及修复方面具有明显效果，例如林建华等研究发现鹿茸多肽可促进软骨细胞增殖，并对其机制进行了研究(《中华创伤骨科杂志》，2007)；董万超等在梅花鹿二杠茸中分离出了鹿茸多肽，实验表明其有抗炎、促生长的作用(《特产研究》，2000)。此外还发现鹿茸多肽具有抗炎活性、促进细胞增殖及修复神经损伤等生物学效应，且具有天然、安全、高效、成本低等特点。例如周秋丽(《天然产物研究与开发》，1998)采用质谱等分离分析手段测得鹿茸天然多肽的分子量在1000-3000Da左右，对骨折有明显促愈合作用，它是通过促进骨、软骨细胞增殖及促进骨痴内骨胶原的积累和钙盐沉积而加速骨折愈合；且发现多肽是鹿茸抗炎镇痛的物质基础，对各种急慢性炎症具有明显的抑制作用。现有技术还发现鹿茸多肽能明显刺激软骨细胞和成骨样细胞的增殖，其增殖作用有明显的量效关系且无种属特异性。近年来，鹿茸多糖也非常受关注。鹿茸中含有的硫酸软骨素、酸性多糖、粘多糖等活性多糖具有类似BMPs诱发骨形成的效果，其多糖活性优于商品硫酸软骨素。

由于鹿茸多肽具有上述优点，使其尤其适合用于制备促骨愈合材料用途。然而，现有技术对这方面的报道较少，主要集中在鹿茸活性组分的提取、保健品的制备。简单列举如下。

CN 109306367 A公开了一种鹿茸磷酸肽的制备方法及应用，将鹿茸酶解、鹿茸磷酸肽富集、纯化，制备成鹿茸磷酸肽；其鹿茸肽制备方法为：将新鲜鹿茸冷冻干燥后粉碎，加入鹿茸质量10～50倍的去离子水，用1～6M的HCl将pH调至1.0～5.0，搅拌均匀后加入鹿茸质量0.1～5.0％的蛋白酶A，在20～80℃温度下酶解0.5～24小时；酶解结束后用1～6M的NaOH将pH调节至4.0～8.0，再加入鹿茸质量0.1～5.0％的蛋白酶B，在20～80℃温度下酶解0.5～24小时，反应结束后将温度升至80～100℃并保温10～30分钟。

CN 107574204 A公开了一种鹿骨肽螯合金属离子的制备方法，其特征在于：将鹿骨脱脂、酶解，利用吸附材料富集具有螯合功能的肽，将螯合肽与人体所需的金属离子反应，制备成鹿骨肽螯合金属离子。通过酶解将鹿骨中蛋白质降解，利用固定化亲和色谱材料富集具有螯合功能的肽，螯合肽可与不同的金属离子反应制备成为具有不同功效的鹿骨肽螯合金属离子，可用作人体金属元素补充剂。

CN 106860913 A提供了一种鹿茸多肽的应用、牙种植体及其表面处理方法，涉及口腔种植技术领域，包括将鹿茸多肽溶于三蒸水中，制成鹿茸多肽溶液，将鹿茸多肽溶液涂抹在牙种植体的表面，然后将牙种植体种植于牙槽骨，其活性小肽有助于牙种植体与骨的结合速度，缩短治疗疗程。但是，该方法直接将鹿茸多肽溶液涂抹在牙种植体的表面，效果差且持续生效时间短，有效组分易流失。