[发明专利]在卵泡同步化后的单剂重组牛FSH

说明书

本发明涉及在卵泡同步化后的单剂重组牛FSH。具体地，本发明涉及使用有生物活性的重组促卵泡激素(rFSH)在非人类哺乳动物中提高生殖性能的方法和组合物。本发明还涉及使用rFSH在非人类哺乳动物中增加排卵或胚胎产生或妊娠的方法。本发明尤其可用于有蹄类动物例如牛或马。

本申请是国际申请日2013年11月15日、国际申请号PCT/EP2013/073928于2015年5月18日进入中国国家阶段、申请号201380060063.X、发明名称“在卵泡同步化后的单剂重组牛FSH”的申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及使用有生物活性的重组促卵泡激素(rFSH)在非人类哺乳动物中提高生殖性能的方法和组合物。本发明还涉及使用rFSH在非人类哺乳动物中增加排卵、胚胎产生或妊娠的方法。本发明尤其可以在人工授精或体外授精程序中用于有蹄类动物例如牛或马。

背景技术

在非人类哺乳动物例如牛、马或其他有蹄类动物中提高生殖性能的能力，对所有者来说可以具有显著利益。这可以通过在这样的非人类哺乳动物中提高生育力和/或生殖力来实现。目前，已提出了数种方法或方案来提高生殖性能，它们是基于使用雌二醇和其他激素例如GnRH(促性腺激素释放激素)、LH(促黄体激素)、FSH(促卵泡激素)或孕激素(progestagen)(例如孕酮)来模拟在目标物种中存在的激素的天然或接近天然的水平。一些这些方案包括在雌性中使排卵同步化的步骤，以便以同步化方式促进卵泡的刺激、生长和排卵，允许定时人工授精，避免发情期检测的必要性。这些所谓的同步化方案在全世界被广泛用于商业化牛奶场和肉牛牧场。

用于使卵泡波的出现同步的最常用处理方法之一，包括使用不同类型的雌激素。然而，这种甾类激素在世界的许多地方不能使用，并且已开发了可替选的方法来控制卵泡和黄体期，其目的在于例如在雌二醇不可用的国家中改进胚胎供体母牛的超数排卵过程。一种似乎是有希望的选项的方法是在GnRH诱导的排卵之后，在新的卵泡波出现时启动FSH处理。此外，由于目前可用的FSH产品的半衰期一般来说短(约6小时)，因此超数排卵方案包括每日两次FSH处理，总共4至5日，这是相当耗时、紧张的，并容易发生错误。此外，在目前开发的超数排卵计划期间的这些频繁的管理，使其几乎不可能应用于例如放养在牧场中的肉牛。因此，标准的超数排卵方法是基于在通常发生在天然存在的发情期后8至12天的卵泡波出现时多次注射FSH。这种方法被称为“基于发情期的”，并且它尽管在胚胎产生方面高效，但取决于发情周期的阶段，并需要发情期检测。较晚的研究发现，与允许更理想的从授精到排卵的时间间隔的现代同步化方案相比，在“基于发情期”的程序中生育率明显较低。

为了确定延长FSH刺激方案是否能够增加排卵反应，已进行了研究。作者似乎得出结论，将FSH注射时间长度从连续4天延长到连续7天，可以维持卵泡生长并导致更多卵泡获得排卵能力。更多的研究正在进行中，以在不同牛品种中验证这个假说。

在另一个已报道的方案中，将母牛用FSH处理3天而不是4天，并且将第4天的最后两次注射用2eCG(马绒毛膜促性腺激素)注射代替(Barros等，2008)。这种处理似乎增加了胚胎的数目，尽管处理时间仍然长。此外，eCG是相当大的分子，并且已被描述在重复使用时诱导抗体形成，并且可能限制这些类型的方案的广泛/频繁使用。

在试图减少FSH注射的数目的尝试中，已开发了一种可选替方案，其中将FSH包埋在缓释聚合物(透明质酸)中。使用这种缓释制剂，在“基于发情期”的超数排卵计划后进行单次注射。然而，作者得出结论，透明质酸也过于粘稠，并且单次肌内注射产生较低的超数排卵反应(Bo等，2010)。

EP2134165提出了一种使用单链FSH提高生殖的可替选方法，在所述单链FSH中两个亚基由肽连接物共价连接，其在发情期后7至13天在单一药剂中给药。根据这种方法，通过鉴定参考发情期(或发情)日期(最后发情的当天)来准备用于FSH注射的动物，然后在动物周期的第7至8天之间在单次注射中给药FSH。结果似乎令人满意，但是需要动物的个体观察和监测来确定最有效的处理方式。

发明概述