[发明专利]包含CD28和4-1BB的嵌合抗原受体及其应用

说明书

本申请涉及一种嵌合抗原受体及其应用。所述嵌合抗原受体，包括，肿瘤抗原结合结构域、胞外铰链及跨膜结构域、胞内的共刺激信号结构域、信号转导结构域；其中，所述共刺激信号结构域包括CD28和4‑1BB功能区，所述4‑1BB功能区包括QEED和EEEE。本申请提供的CAR，包含了两个共刺激信号序列突变体的CAR在体外的增殖能力更强，为临床上治疗白血病提供新的肿瘤细胞药物，也为临床上用嵌合抗原疗法治疗实体瘤提供新的设计思路。

技术领域

本申请涉及抗肿瘤药物制备领域，具体涉及一种嵌合抗原受体及其应用。

背景技术

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一，特别是，白血病、淋巴瘤等血液肿瘤的发病率居高不下。已用于临床治疗白血病和淋巴瘤的药物有KymriahTM和Yescart。它们在临床上达到了一定的治疗效果，但是，经其治疗后的白血病和淋巴瘤仍然会复发；并且存在细胞因子风暴，神经毒性等副反应。且病人的缓解率不够高，还需要桥接骨髓移植等其他治疗手段。

桥接骨髓移植也存在较大的缺陷，如符合配型要求的骨髓难以获取，移植并发症较多，移植后复发率较高等等。因此，临床上迫切需要开发新型血液肿瘤治疗手段，以便满足患者的需求。

发明内容

本申请提供一种嵌合抗原受体及其应用，可延长T细胞在体内的存续时间，改善肿瘤治疗效果，降低肿瘤的复发率。

第一方面，本申请实施例提供了一种嵌合抗原受体，肿瘤抗原结合结构域、胞外铰链及跨膜结构域、胞内的共刺激信号结构域、信号转导结构域；其中，所述共刺激信号结构域包括CD28和4-1BB功能区，所述4-1BB功能区包括QEED和EEEE。

在一些实施例中，所述肿瘤抗原结合结构域包括靶向CD19的单链抗体，所述靶向CD19的单链抗体的序列如SEQ NO:1所示；所述胞外铰链及跨膜结构域包括CD28胞外铰链及跨膜结构域；所述信号转导结构域包括CD3ζ，所述CD3ζ的序列如SEQ NO:3所示。

在一些实施例中，所述共刺激信号结构域为CD28序列和4-1BB全长序列的组合；所述的嵌合抗原受体序列如SEQ NO:4所示。

在一些实施例中，所述共刺激信号结构域为CD28序列和4-1BB功能区序列的组合；所述的嵌合抗原受体序列如SEQ NO:5所示；其中，在CD28序列和4-1BB功能区序列的组合中，CD28序列位于4-1BB功能区序列的N端。

在一些实施例中，所述共刺激信号结构域为突变的CD28序列和4-1BB功能区序列的组合；其中，突变的CD28为将CD28中四个连续的氨基酸突变为YMNM突变成AAAA得到的；所述的嵌合抗原受体序列如SEQ NO:6所示。

在一些实施例中，所述共刺激信号结构域为CD28序列和4-1BB功能区序列的组合；所述的嵌合抗原受体序列如SEQ NO:7所示；其中，4-1BB功能区序列位于CD28序列的N端。

第二方面，提供了一种嵌合抗原受体表达载体，包括编码第一方面所述的嵌合抗原受体的核苷酸。

第三方面，提供了一种表达第一方面所述的嵌合抗原受体的T细胞。

第四方面，提供了第三方面所述的T细胞在制备抗肿瘤药物中的用途。

在一个实施例中，所述肿瘤为血液肿瘤；所述血液肿瘤包括以下任一种：

白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤。

第五方面，提供了一种抗肿瘤药物，包括第三方面所述的载体或第一方面所述的T细胞。

在一个实施例中，所述肿瘤为血液肿瘤；所述血液肿瘤包括以下任一种：

白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤。