[发明专利]O型口蹄疫病毒新型基因工程亚单位疫苗

权利要求书

1.一种免疫组合物，其特征在于包含：采用序列如SEQ ID NO:1所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:1的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP3蛋白；采用序列如SEQ ID NO:12所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:12的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1蛋白；以及，选自O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2蛋白或O型口蹄疫病毒结构蛋白VP4蛋白的一种或两种的任意组合。

2.根据权利要求1所述的免疫组合物，其特征在于，所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP3蛋白包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:19的全长氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列；所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1蛋白包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:22的全长氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的免疫组合物，其特征在于，所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2蛋白包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:21的全长氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列；所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP4蛋白包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:23的全长氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列。

4.根据权利要求1所述的免疫组合物，其特征在于，所述免疫组合物进一步包含O型口蹄疫病毒结构蛋白VP0蛋白，所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP0蛋白是通过序列如SEQ IDNO:4所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:4的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码获得。

5.根据权利要求4所述的免疫组合物，其特征在于，所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP0蛋白包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:20的全长氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列。

6.根据权利要求3所述的免疫组合物，其特征在于，其中，

所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2蛋白是通过序列如SEQ ID NO:8所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:8的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码获得；

所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP4蛋白是通过序列如SEQ ID NO:16所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:16的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码获得。

7.权利要求1～6任意一项所述免疫组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

S1、将O型口蹄疫病毒结构蛋白的基因克隆到对应的穿梭载体上，得到重组穿梭载体；

S2、将重组穿梭载体转化到含有杆状病毒基因组质粒的DH10Bac菌中，重组穿梭载体中目的基因表达框定向插入杆状病毒基因组质粒中，获得含有目的基因表达框的重组杆状病毒基因组质粒；

S3、将重组杆状病毒基因组质粒转染昆虫细胞获得重组杆状病毒；

S4、将获得的重组杆状病毒接种昆虫细胞，在反应器中大规模生产重组O型口蹄疫病毒结构蛋白；

S5、将S4步骤中获得的重组O型口蹄疫病毒结构蛋白加入到佐剂中，即得所述免疫组合物。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤S1包括：将O型口蹄疫病毒结构蛋白VP3和VP1的编码基因以及选自O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2、VP4中的任意一种或两种的表达框均克隆到同一穿梭载体上，即得到所述的重组穿梭载体。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，步骤S1包括：将O型口蹄疫病毒结构蛋白VP3和VP1的编码基因，选自O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2、VP4中的任意一种或两种的表达框以及O型口蹄疫病毒结构蛋白VP0的表达框均克隆到同一穿梭载体上，即得到所述的重组穿梭载体。