[发明专利]CLIC4在制备放射治疗鼻咽癌制剂中的应用

说明书

本发明为CLIC4在制备放射治疗鼻咽癌制剂中的应用，属于生物医学技术领域，涉及CLIC4作为蛋白标志物在制备预测鼻咽癌光子辐射耐受制剂中应用；本发明运用细胞存活克隆形成实验检测辐射耐受细胞与敏感细胞在细胞不同光子剂量下的存活能力差异，结果显示，相同剂量下，鼻咽癌辐射耐受细胞的克隆形成能力显著强于辐射敏感细胞，即鼻咽癌辐射耐受细胞辐射敏感性低。所述的CLIC4可作为蛋白标志物制备预测鼻咽癌光子辐射耐受制剂，以及制备判断鼻咽癌放疗预后情况制品和制备抑制鼻咽癌细胞辐射耐受药物和用于筛选增加肿瘤细胞辐射敏感性的潜在药物。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，涉及CLIC4作为蛋白标志物的新用途，具体涉及CLIC4作为蛋白标志物在制备预测鼻咽癌光子辐射耐受制剂中应用；尤其涉及CLIC4的表达用于制备在鼻咽癌光子辐射敏感性差异以及其在鼻咽癌放疗效果预测和治疗制品中的应用。

背景技术

现有技术公开了鼻咽癌是发生在鼻咽侧壁和顶部的恶性肿瘤，发病率在耳鼻咽喉恶性肿瘤中居于第一位，临床研究显示，鼻咽癌主要好发于东南亚,特别是中国华南地区。实践显示，放射治疗是治疗鼻咽癌的首选方法之一。随着科学技术的进步，立体定向放疗技术的应用越来越广泛，据统计，早期鼻咽癌的放疗后5年生存率达到了90％多，晚期生存率也达到了70％多，但遗憾的是，放疗耐受会导致治疗效果差和早期复发，因此，寻找鼻咽癌产生光子耐受的基因/蛋白对今后鼻咽癌治疗的发展具有非常重要的实践指导意义。

近年来，随着经济的发展和科技的进步，TMT(Tandem Mass Tag)差异蛋白质组学定量分析技术应用越来越广泛。本发明的研究退队通过将TMT标记、高效液相色谱分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术等一系列前沿技术的有机结合，对有关样本进行定量蛋白组的研究，之后对包含定量信息的蛋白质进行了系统的生物信息学分析，包括蛋白注释、功能分类、功能富集及基于功能富集的聚类分析，并综合以上信息，结合临床基因芯片筛选出可能的辐射敏感性差异相关的分子标志物，将为今后鼻咽癌预后相关标志物的研究提供理论基础和科学依据。

本发明通过质谱结果筛选出在鼻咽癌辐射耐受细胞株与辐射敏感细胞株中差异表达的基因，显示CLIC4在鼻咽癌辐射耐受株细胞中的表达明显高于鼻咽癌辐射敏感株细胞中的表达，检索Pubmed及相关数据库发现，CLIC4在鼻咽癌辐射敏感性中的功能未见报道。

基于现有技术的基础与现状，本申请的发明人拟提供CLIC4作为蛋白标志物的新用途，具体涉及CLIC4作为蛋白标志物在制备预测鼻咽癌光子辐射耐受制剂中应用。

发明内容

本发明的目的是基于现有技术的基础与现状，提供CLIC4作为蛋白标志物的新用途，具体涉及CLIC4作为蛋白标志物在制备预测鼻咽癌光子辐射耐受制剂中应用。

本发明通过质谱结果筛选出在鼻咽癌辐射耐受细胞株与辐射敏感细胞株中差异表达的基因CLIC4，结果显示CLIC4在鼻咽癌辐射耐受株细胞中的表达明显高于鼻咽癌辐射敏感株细胞中的表达。

更具体的，本发明取待测样本，然后分析比较待测样本与正常对照中CLIC4的表达量，CLIC4的表达量越高，鼻咽癌细胞的光子辐射敏感性越差，耐受性越强。

本发明中，所述的待测样本可以是细胞样本，组织样本，或者细胞、组织的蛋白抽提物；正常对照可以是正常人的样本，较好的是取自患者本人肿瘤组织周边的组织或者细胞样本；检测时，通常采用相关抗体等检测样本中CLIC4含量；实验结果用三次独立实验的平均值和标准差表示，用双侧t检验来比较差异；p＜0.01认为具有统计学差异；所有数据采用SPSS V13.0软件或者具备类似统计功能的软件分析。

本发明的CLIC4是细胞内氯离子通道蛋白，其序列及相关信息可以参考Genbank数据库。