[发明专利]一种山楂花来源的ACE抑制活性化合物的制备方法

说明书

一种山楂花来源的ACE抑制活性化合物的制备方法。本制备方法包括二步，第一步以干燥的山楂花为原料，粉碎后用石油醚脱脂，将脱脂后的山楂花采用80%乙醇回流提取，滤过，合并提取液，回收溶剂得到乙醇总浸膏；乙醇总浸膏分散于水中，用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，回收溶剂后得石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相；第二步将乙酸乙酯相采用200目硅胶柱色谱分离，以石油醚‑丙酮进行洗脱，得到6个组分，按照所得组分极性标记为组分1‑6，将组分5经反向C18硅胶柱色谱分离，以甲醇‑水进行梯度洗脱，然后经半制备高效液相色谱纯化，乙腈‑水洗脱，得到化合物1。本发明用于山楂花的ACE抑制活性化合物的制备。

技术领域

本发明涉及一种山楂花来源的ACE抑制活性化合物的制备方法。

背景技术

山楂(Crataegus pinnatifida Bunge)，又名山里果、山里红，蔷薇科山楂属，落叶乔木;在全国大部分地区均有分布。目前山楂的研究主要集中在果实、果皮等。研究表明，山楂主要含有黄酮和酚酸类物质，并具有很好的体外抗氧化活性和降血脂活性。然而，山楂花的研究报道尚不多见。

高血压是一种以动脉收缩压或舒张压升高为特征的临床综合症，它伴有心脏、血管、脑和肾等器官器质性病变，是引发心脏、脑、肾和眼等多种器官并发症和导致中风、冠心病的重要致病因子。高血压的病因复杂，已知体内许多系统与血压调节有密切关系，其中最重要的是升压系统-肾素-血管紧张素系统(Renin-Angiotensin System, RAS)和降压系统-激肽释放酶-激肽系统(Kallikrein-Kinin System, KKS)。系统中存在的血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme, ACE)是影响两者的关键酶。在RAS中，ACE水解无升压活性的血管紧张素Ⅰ，生成具有升压活性的血管紧张素Ⅱ，同时在KKS中，ACE能够降解具有降压活性的缓激肽，使之失去降血压活性。目前，普遍使用的人工合成ACE抑制剂如卡托普利、依那普利等虽然能够有效地降低血压，但仍存在如咳嗽、皮疹及味觉功能紊乱等诸多不良反应。因此，寻找天然，安全的ACE抑制剂用于预防或治疗高血压引起了大量研究者的关注。

发明内容

本发明的目的是提供一种拓展了山楂花的资源再利用，成本低，具有工业化生产的潜力的一种山楂花来源的ACE抑制活性化合物的制备方法。

上述的目的通过以下的技术方案实现：

一种山楂花来源的ACE抑制活性化合物的制备方法，本制备方法包括二步，第一步以干燥的山楂花为原料，粉碎后用石油醚脱脂，将脱脂后的山楂花采用80%乙醇回流提取，滤过，合并提取液，减压回收溶剂，得到乙醇总浸膏；将乙醇总浸膏分散于水中，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，减压回收溶剂后，得到石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相；第二步将乙酸乙酯相采用200-300目硅胶柱色谱分离，以石油醚-丙酮进行梯度洗脱，得到6个组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为组分1、2、3、4、5、6，将组分5经反向C18硅胶柱色谱分离，以甲醇-水进行梯度洗脱，然后经半制备高效液相色谱纯化，乙腈-水洗脱，得到化合物1。

所述的一种山楂花来源的ACE抑制活性化合物的制备方法，所述的第一步乙醇浸泡提取的具体步骤为：脱脂后的山楂花用80%乙醇回流提取三次，每次1-2小时，过滤，合并提取液。

所述的一种山楂花来源的ACE抑制活性化合物的制备方法，所述的第一步和所述的第二步得到的具有ACE抑制活性的山楂花具有有效成分。

有益效果

1.本发明以山楂花为原料，从其提取物中分离得到一个具有ACE抑制活性的黄酮苷类化合物，在一定程度上拓展了山楂花的资源再利用。

本发明提取方法简单，原料来源丰富，成本低，具有工业化生产的潜力。

本发明通过体外活性实验表明化合物1具有较强的ACE抑制活性作用。

具体实施方式