[发明专利]溶液共混法包埋复合微生态制剂的工艺有效
| 申请号: | 201910612686.2 | 申请日: | 2019-07-09 | 
| 公开(公告)号: | CN110283730B | 公开(公告)日: | 2021-03-23 | 
| 发明(设计)人: | 王际辉;肖珊;陆璐 | 申请(专利权)人: | 东莞理工学院 | 
| 主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C12N11/10;C12N11/084;C12N11/04;C12R1/865;C12R1/125;C12R1/25;C12R1/01 | 
| 代理公司: | 大连万友专利代理有限公司 21219 | 代理人: | 王发 | 
| 地址: | 523808 广*** | 国省代码: | 广东;44 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 溶液 共混法 包埋 复合 生态 制剂 工艺 | ||
1.一种利用溶液共混法包埋复合微生态制剂的工艺,包括以下步骤:
a.复合微生态制剂菌悬液的制备:将芽孢杆菌CICC20037,乳酸菌ACCC11016,酿酒酵母ACCC20165,光合细菌CCREMSDMCC150016共4种菌按照各属种比1:1:1:1,接种量为3%同时接菌,在25℃,初始pH为7.0,180rpm/min条件下混合培养24h,得到复合微生态制剂菌液;在4℃、10000rpm/min转速下离心5min,弃上清后,用生理盐水洗涤三次并离心收集菌体,最后用生理盐水定容至浓度为1012-1015cfu/mL,得复合微生态制剂菌悬液;
步骤b.共聚物凝胶的配制:将6%的PVA溶液,3%的SA溶液按照体积比1:1比例混合,加入2g改性沸石粉,水浴锅恒温90℃搅拌1h,即得到共聚物凝胶;
所述6%的PVA溶液采用称取6g聚乙烯醇、加入到100mL蒸馏水中,90℃水浴加热,恒温搅拌1h,即配成质量分数为6%的PVA溶液;3%的SA溶液采用称取3g海藻酸钠加入到100mL蒸馏水中,90℃水浴加热,恒温搅拌1h,即配成质量分数为3%的SA溶液;
所述改性沸石粉采用将沸石浸泡盐酸中24h,冲洗至中性后烘干,再放入饱和NaCl溶液中浸泡24h,去离子水冲洗至中性,105℃下烘干3h,粉碎过筛,即制得改性沸石粉;
步骤c.PVA-SA-沸石粉微球的制备:用注射器吸取共聚物凝胶,在磁力搅拌下,距交联剂液面上方5cm左右垂直滴入,然后低温固定24h,蒸馏水冲洗三次即得PVA-SA-沸石粉微球,于4℃冰箱冷藏;
所述交联剂液采用称取3g CaCl2固体、4g硼酸固体溶于100mL蒸馏水中制得凝胶;无菌条件下,取复合微生态制剂菌悬液加入冷却的凝胶溶液中,按菌液:凝胶的体积比为1:15混合均匀,即得交联剂,
步骤a中复合微生态制剂为4种菌混合发酵而成的复合微生态制剂,
步骤b中沸石粉为钠性沸石粉,粒径≤100目,
步骤c中PVA-SA-沸石粉微球直径为4mm。
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